160.81生物类化合物.doc.doc

C 52 GBZ 中华人民共和国国家职业卫生标准 GBZ/T 160.81－2004 ———————————————————————— 工作场所空气有毒物质测定 生物类化合物 Methods for determination of biological compounds in the air of workplace 2004年5月21日发布 2004年12月1日实施 ———————————————————————— 中华人民共和国卫生部 发布 GBZ/T 160.81－2004 前 言 为贯彻执行《工业企业设计卫生标准》（GBZ 1）和《工作场所有害因素职业接触限值》（GBZ 2），特制定本标准。本标准是为工作场所有害因素职业接触限值配套的监测方法，用于监测工作场所空气中生物类化合物 [包括洗衣粉酶等]的浓度。 本标准从2004年12月1日起实施。 本标准由全国职业卫生标准委员会提出。 本标准由中华人民共和国卫生部批准。 本标准起草单位：上海医科大学公共卫生学院。 本标准主要起草人：梁友信等。 GBZ/T 160.81－2004 工作场所空气有毒物质测定 生物类化合物 1 范围 本标准规定了监测工作场所空气中生物类化合物浓度的方法。 本标准适用于工作场所空气中生物类化合物浓度的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款，通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GBZ 159 工作场所空气中有害物质监测的采样规范 3 含酶洗衣粉中酶的抗体结合—比色法 3.1 原理 空气中含酶洗衣粉粉尘中的酶用玻璃纤维滤纸采集，洗脱后，与包被在酶标板上的特异性抗体（Ab1）结合，然后加入特异性抗体（Ab2），最后与一连有标记物的抗体（Ab3）结合，再与显色剂反应生成有色化合物，比色定量。 3.2 仪器 3.2.1 玻璃纤维滤纸。 3.2.2 采样夹，滤料直径40mm。 3.2.3 小型塑料采样夹，滤料直径25mm。 3.2.4 空气采样器，流量0～10L/min。 3.2.5 烧杯，50ml。 3.2.6 酶标板和酶标板盖。 3.2.7 多孔道微量加样器。 3.2.8 可调微量加样器。 3.2.9 恒温箱。 3.2.10 离心管，25ml。 3.2.11 具塞试管，10ml。 3.2.12 酶标仪。 3.3 试剂 实验用水为去离子水。所有试剂于冰箱保存。 3.3.1 抗体包被缓冲液，pH＝9.6±0.2：称取1.51g 碳酸钠和2.93g 碳酸氢钠，溶于1000ml 水中。可保存2 个月。 3.3.2 洗板液：称取29.22g 氯化钠、1.86g Tris和1.0g 牛血清白蛋白(BSA)，溶于1000ml 水中，用盐酸溶液(6mol/L)调pH至8.0，加入0.5ml 吐温20，混匀，可保存1 周。 3.3.3 柠檬酸-磷酸缓冲液，pH＝5.0±0.2：称取7.30g 柠檬酸和23.87g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)溶于1000ml 水中，可保存1 个月。 5.4 BSA封闭液：2.0g BSA溶于100ml 洗板液中。 3.3.5 样品萃取液：称取29.22g 氯化钠、0.93g Tris、4.96g 硫代硫酸钠(Na2S2SO3·5H2O)和0.147g 氯化钙(CaCl2·2H2O)，溶于约800ml 水中，加入1.0g BSA，溶解后，用盐酸溶液(6mol/L)调pH至8.0，转移到1000ml 容量瓶中，定容后加入1.0ml 吐温20，混匀，可保存1 周。 3.3.6 邻苯二胺（OPD）溶液，pH＝5.0：称取8.0mg OPD，置于50ml 棕色瓶中，加入15ml 柠檬酸-磷酸缓冲液，溶解后，加入5l 过氧化氢(30％)，混匀。临用前配制。若溶液变黄，应重新配制。 3.3.7 兔抗体包被溶液：用10ml 抗体包被缓冲液稀释10l 兔抗血清，混匀。 3.3.8 豚鼠抗体：用10ml 洗板液稀释10l 豚鼠抗体，混匀。 3.3.9 标有过氧化物酶的兔抗豚鼠抗体：用10ml 洗板液稀释