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HPLC原理及基本操作 色谱法简单分类 高效液相色谱(HPLC) High Performance Liquid Chromatogrphy HPLC的应用 1、在生物化学和生物工程中的应用 2、在医药研究中的应用 3、食品分析 4、环境分析 5、精细化工 发展趋势 1.新型固定相: 如手性固定相. 2.新型检测器(Detector): 如PFPD(GC), ELSD(PHLC). 3.色谱新方法: 如SFC, HPCE, 4.色谱联用技术: 如GC-MS, GC-FTIR, PHLC-MS, SFC- MS, GC-ICPAES. 5.色谱专家系统: 优化样品处理,分离条件,定量及结果分析 * * * * * 慢 中等 快 色谱分离 Temporal course 淋洗液 1．1906年由俄国植物学家Tsweet创立(命名) 植物色素分离 2．现在：一种重要的分离、分析技术 固定相(Stationary phase)——固体或是液体 流动相(Mobile phase)——液体或气体 色谱柱(Column)——各种材质和尺寸 被分离组分——不再仅局限于有色物质 定义：利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法 目的：定性分析或定量分析 按溶质在分离过程中的原理： 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 体积排阻色谱 亲和色谱 高选择性 高效能 高灵敏度 分析速度快 应用范围广 对未知物分析的定性专属性差 需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS) 储存和输送液体设备 进样系统 柱系统 检测器 控制和数据处理系统 1. 保留时间 tR(retention time) 2. 死时间t0： 3.调整保留时间tR’