当归化学成分藁本内酯的提取纯化.pdfVIP

当归化学成分藁本内酯的提取纯化 马建龙1,2 戴荣继1,2* 邓玉林1,2 徐文豪3 1. 北京理工大学生命科学与技术学院 北京100081 2. 北京理工医药技术开发中心有限公司 北京100081 3 . 中国医药研究开发中心 北京102206 摘要 当归挥发油中主要有效成分藁本内酯的纯品虽然在室温下不稳定 但在挥发油中可以稳定存在 所 以控制挥发油的质量可以把藁本内酯作为指标成分 由于藁本内酯制备方法的复杂及其纯品的稳定性问 题 限制了其在质量控制方面的应用 本研究用经典柱色谱的方法制备藁本内酯纯品 实验结果表明此法 简单可行 关键词 当归 化学成分 挥发油 藁本内酯 当归是伞形科植物当归的干燥根 有补血活血 调经止痛 润畅通便之功 为治疗妇科褚证之要药 神农本草经 以上品载之 在中成药中的应用频率甚高 当归所含的化学成分主要是挥发油[1] [2] [3] [4] [5] [6] 在当归及其成药的质量控制方面 有机酸 及多糖类 文献报道多以水溶性成分阿魏酸的含量为控制 指标 [7] [8] [9] 而对其挥发油中的成分则涉及很少 主要是由于当归挥发油 的主要成分藁本内酯 的制备流程 复杂 所用设备昂贵 且在室温下不稳定 限制了挥发油在质量控制方面的应用 文献报道的纯化藁本内 酯的方法[10] [11] 以制备薄层色谱及制备型HPLC 为主 这些方法的不足之处主要是制备量小 制备成本高 在一般的实验室中无法制备 本文就经典柱色谱的方法制备了克级藁本内酯 现叙述如下 1.实验材料 1 原料 当归挥发油 2001 年4 月购自上海云峰制药厂 2 实验仪器 旋转蒸发仪 上海申生实验仪器厂 10-AP 型高效液相仪 日本岛津公司 FX-100 型核磁共振仪 Mat-701 型质谱仪 3 试剂 硅胶G 200-240 目 青岛海洋化工厂 硅胶G 薄层板 青岛海洋化工厂 其它试剂均为AR 级 2.实验部分 1 提取分离 称取当归挥发油 10 克 加15 倍量95%乙醇溶解后 置冰箱内放置一周后 取出 在低温下离心 取 上清液 回收溶剂 用适量拌样 上柱 用石油醚乙酸乙酯洗脱 收集洗脱液5 份 将第 1 份回收溶剂 后 用适量硅胶拌样 上柱 用石油醚苯乙酸乙酯洗脱 收集洗脱液3 份 将第 1 份回收溶剂 得淡 黄色油状物2.36 克 低温保存 1 2 纯度检查 供试品溶液的制备 取制备的淡黄色油状物少许 用甲醇溶解 得供试品溶液 薄层色谱条件 展开系统 石油醚苯乙酸乙酯 1591 显色条件 紫外灯365nm 下观察 薄层色谱图 HPLC 条件 色谱柱 4.6mm×200mm, 固定相YWG-C18 粒度 5um 流动相 甲醇10%乙丙醇 5347 检测波长 284nm 检测温度 30 高效液相色谱图 以上实验结果表明 所得淡黄色油状物为单一成分 3 光谱鉴定 紫外光谱λmaxnm 217,273,321(肩) 核磁共振谱 ppm (CHCl3 溶剂) δ 0.96 三重峰 J=8Hz 3H 1.40-1.49 多重峰 J=8Hz 2H 2 2.28-2.89 多重峰 J=9Hz 6H 5.28 多重峰 J=8Hz 1H