声动力治疗巨噬细胞通过促进ATP释放趋化单核细胞科研训练专业论文.docVIP

哈尔滨医科大学 七年制学生基础阶段 科研训练论文 题 目 ： 声动力治疗巨噬细胞通过促进ATP释放趋化单核细胞 学科、专业 ： 病理生理学教研室 目 录 目 录 1 中文摘要 2 Abstract 3 文献综述 5 前 言 12 材料与方法 13 技术路线 15 结 果 16 讨 论 19 结 论 21 致 谢 21 参考文献 22 中文摘要 目 的：证明声动力治疗(sonodynamic therapy,SDT)巨噬细胞能够趋化单核细胞的聚集并探讨其机制。 方 法：将实验对象分为对照组、SDT组、ATPase组及SDT-ATPase组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞，而SDT组是在对照组基础上加入终浓度为15μg/ml的5-氨基酮戊酸（5-Aminolevulinic acid, ALA），孵育2小时后接受声动力治疗。ATPase组及SDT-ATPase组则是分别在对照组和SDT组基础上加入ATPase。将实验对象离心后取其细胞上清液并分别用transwell方法研究其对单核细胞的趋化作用；将实验对象分为对照组、SDT组、zVAD-fmk组及SDT-zVAD组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞，SDT组是在对照组基础上加入 ALA，孵育2小时后接受声动力治疗。zVAD-fmk组及SDT-zVAD组则是分别在对照组和SDT组基础上加入N-苯甲基氧化碳酰-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氯化丙酮(zVAD-fmk)。将实验对象离心后，分别用荧光素酶方法检测细胞上清及细胞内ATP量的变化。 结 果：用transwell方法研究声动力治疗后的细胞上清对单核细胞的趋化作用时，从募集的单核细胞数量来看，声动力治疗组明显高于对照组（p0.05），加入ATPase并进行声动力治疗组与声动力治疗组相比显著降低，对照组与ATPase组无统计学差异（p0.05）；用荧光素酶方法，检测声动力治疗巨噬细胞后及加入凋亡抑制剂后细胞上清及细胞内ATP量的变化得出：声动力治疗组明显高于对照组，约为其3倍（p0.05）；加入zVAD-fmk并进行声动力治疗组较声动力组显著降低；对照组与zVAD-fmk无统计学差异（p0.05）。 结 论：声动力治疗巨噬细胞通过促进凋亡相关的ATP释放趋化单核细胞 关键词：ATP 动脉粥样硬化 声动力疗法 巨噬细胞  Abstract Purpose: This paper is designed to investigate the effects of monocytes recruitment after sonodynamic therapy and delve into its mechanism. Methods: The subjects were divided into four groups: The control group,the SDT group, the ATPase group and the SDT-ATPase group.The control group merely contains THP-1 derived macrophages.The SDT one,containing macrophages and sonosensitizer ALA ,was incubated with fresh medium for 6 h before being exposed to pulse ultrasound irradiation. The ATPase group was a mixture of the control group and ATPase. Similarly,the SDT-ATPase group , was comprised of the SDT group and ATPase. Cell-free supernatants from each group were assessed for their ability to attract THP-1 monocytes in a transwell migration assay.For a further study of ATP concentrations changes, we use another four groups of subjects: The control group(macrophages alone),the SD