项目411维生素的测定.pptVIP

引 言 测定食品中维生素在营养分析方面具有重要的意义。 1、可评价食品的营养价值 2、监督维生素强化食品的剂量，以防摄入过多的维生素而引起中毒 橙汁中VC的测定 2.6--二氯靛酚滴定法 学习目标 知识目标： 1.能解读国家标准水果、蔬菜中维生素C含量的测定； 2.能解释2,6-二氯靛酚法测定的维生素C仅为还原型的原因； 3.能说出提取剂必须为草酸或偏磷酸的原因； 4.能解释不同方法测定食品中VC含量原理。 技能目标： 1.能依据国家标准进行食品中VC含量测定实验准备； 2.会准确标定2,6-二氯靛酚溶液，正确进行VC的测定； 3.会分析实验结果、规范书写分析报告，安全操作，真实记录。 素质目标： 1.培养学生严谨、务实的学习精神； 2.培养学生开拓创新、团结协作的职业素质。 基础知识 维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。 维生素C通常采用草酸、草酸—醋酸、偏磷酸—醋酸溶液直接提取。在一定浓度的酸性介质中，可以消除某些还原性杂质对维生素C的破坏作用。 2.6--二氯靛酚滴定法测定原理 还原型抗坏血酸可以还原染料2，6-二氯靛酚。该染料在酸性溶液中是粉红色（在中性或碱性溶液中呈蓝色），被还原后颜色消失；还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中抗杯血酸含量成正比。 具体工作任务分解 任务一：仪器设备及试剂的准备 仪器 锥形瓶：150mL；容量瓶：100mL；酸式滴定管：25mL ；烧杯；移液管：10mL；量筒：50mL 试剂 1％草酸溶液 2％草酸溶液 2,6-二氯酚靛酚溶液：配制好后保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。 抗坏血酸标准液：称取100mg纯抗坏血酸溶解于100mL20g/L的草酸溶液中，此溶液每毫升相当于1mg抗坏血酸。 任务二：样品预处理 量取100mL橙汁饮料→加等量的2％草酸溶液→取20mL→100mL 容量瓶→1％草酸稀释至刻度，混合均匀→过滤备用 〖注〗 2％草酸在此作为提取剂，实验表明：2％草酸提取效率最高，稳定性最好。 任务三：样品VC含量测定 抗坏血酸标准溶液标定 2,6-二氯酚靛酚（染料）标定 样品中维生素C的测定 抗坏血酸标准溶液标定 150mL锥形瓶 吸取标准使用液2mL 加入0.5mL 6%碘化钾溶液+ 3滴1%淀粉溶液 0.001mol/L碘酸钾标准溶液滴定（终点为淡蓝色） C=V1/V2*0.53 C——抗坏血酸标准液的浓度，mg/mL V1——滴定时消耗0.001mol/L碘酸钾标准溶液体积，mL V2——滴定时所取抗坏血酸的体积， mL 0.088——1 mL 0.001mol/L碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量， mg/mL 2,6-二氯酚靛酚（染料）标定 250mL锥形瓶 吸取5mL抗坏血酸标准溶液 加入1%草酸溶液5 mL 摇匀 用2,6-二氯酚靛酚滴定至粉红色（15s不褪色为终点）。 样品中维生素C的测定 3个150mL锥形瓶 分别吸取样品过滤液5mL 快速滴入2，6二氯靛酚溶液，直至红色不立即消失 然后一滴一滴的加入2，6二氯靛酚溶液，以呈现的粉红色在15s内不褪色为终点 1个150mL锥形瓶 分别吸取蒸馏水5mL 快速滴入2，6二氯靛酚溶液，直至红色不立即消失 然后一滴一滴的加入2，6二氯靛酚溶液，以呈现的粉红色在15s内不褪色为终点 注: 对非还原抗坏血酸(如脱氢)不能测出; 易受还原性物质影响;适用于新鲜果蔬. 测定过程中避免金属的干扰 任务四：分析结果数据处理 任务五：填写检验报告单 1、2，6二氯靛酚/抗坏血酸=1mg/mL的含义是什么？ 2、样品滤液颜色较深会影响滴定终点的观察，该如何处理？ 3、本方法测定的是试样中抗坏血酸总量吗？为什么？ 4、配制好的染料溶液是蓝色的，为什么滴定终点却是粉红色的？ 2．适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器实验室常用设备。荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。打碎机。 4.操作步骤 4.1样品制备全部实验过程应避光。称取100g鲜样，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。 4.2氧化处理 分别取样品滤液及标准使用液各100ml于带盖三角瓶中，加2g活性炭，用力振摇1min，过