棉花黄萎菌系致萎力差异与毒素相关基因关系初步分析.pdfVIP

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棉花黄萎菌系致萎力差异与毒素相关基因关系初步分析.pdf

棉花黄萎菌系致萎力差异与毒素相关基因关系初步分析 张婷婷,杨春晓。齐俊生 (中国农业大学棉花研究中心,农学与生物技术学院,北京100094) 摘要:黄萎菌毒素是导致棉花发病的主要目素,本试验目的在于找出不同菌系黄萎菌毒素相关基 园及其与致病力之间的差异关系。为进一步研究毒素相关基因与其致病性的关系。也为鉴定不同致病 力黄萎菌系提供一定依据。本试验测定了不同黄萎菌的致病力,结果表明不同黄萎菌菌系的致病力 存在较大差异;用PCR扩增了其毒素相关基因,通过测序及比对表明:不同菌系毒素相关基因之间 在碱基以及推测氨基酸序列均存在差异,强致病力菌系V。。的毒素相关基因在第136位和第190位 分别为胞嘧啶(c)和腺嘌呤(A),而其它菌系为胸腺嘧啶(T)和乌嘌呤(G),结果使得V。。的氨基酸 序列的第8个和第26个氨基酸分别为脯氨酸(P)和天冬豌胺(N),而其它4个菌系为亮氨酸(L)和 为丝氨酸(s)。由此初步推断致病力不同可能由毒素相关基因差异所致。 关键词:棉花黄萎茵;毒素;致萎力;相关基目;相关性 onDifferentialPowerofV.d09 Cotton PrimaryAnalysis Wilting Upland andTheirGenesRelativeto Phytotoxln ZHANG Ting—ting,YANGChun-xiao,QIJun·sheng and Agricultural 100094,凸iM) (CollegeofAgronomyBiotechnology,ChinaUniversity,Beijing 黄萎病是严重影响棉花产量和品质的主要病害之一。目前国内外尚缺乏防治该病的有效方法,抗 病育种方面也没有明显进展。黄萎菌毒素是导致棉花发病的主要因素,本试验目的在于找出不同菌系 黄萎菌毒素相关基因及其与致病力之间的差异关系,也为鉴定不同致病力黄萎菌系提供一定依据。 我们利用不同菌系黄萎菌的培养滤液(细菌过滤器除菌)对棉苗的致萎力检测结果表明:毒素浓 h后,棉苗均可表现出重度萎蔫,但不同菌株的致萎速度 度为22岷·rrIl‘‘的情况下,毒素处理棉苗48 h的时候,最先表现出致萎的症状,其它菌株在18h,基本投有棉苗 快慢有较大差别。菌系V。在18 萎蔫发生。在28h时,各菌株处理后的棉苗全部开始表现出萎蔫症状,但萎蔫轻重存在差异。其中 V¨。、v:。毒素处理的棉苗症状最轻,分别都只有1株棉苗表现出轻度萎蔫症状,V。。毒素处理的棉苗 萎蔫程度中等,v:。毒素处理的棉苗萎蔫最严重。38h后全部棉苗均开始表现萎蔫,但V。和V,。处 理的棉苗表现为严重萎蔫,V。和V。毒素处理的棉苗萎蔫程度稍轻。 本试验结果表明不同黄萎菌菌系的致病力是存在差异的,菌系V。。和V,。为强致病力菌系,但 V.。致萎速度较慢;v¨。和V。为弱致病力菌系。这一结果与中国农科院植保所结果基本一致。 利用同源序列设计引物,PCR扩增获得了5个不同致病力菌系毒素相关基因的序列。通过序列 比对及推测氨基酸序列比对表明:(1)强弱致病力黄萎菌菌系在毒素相关基因DNA序列及其氨基酸 编码均存在一定的差异。强致病力菌系V,46的毒素相关基因在第136位和第190位分别为胞嘧啶 这可能是导致V。。致萎速度较慢的原因之一。(2)几个弱致病力菌系之间也存在碱基序列的差异。 胞嘧啶(c),使得v。编码第231个氨基酸的密码子为终止密码子,而其它4个菌系此位置为谷氨酰 丝氨酸(s),而其它4个菌系的为脯氨酸(P)。 本试验目前只测定了5个不同菌系黄萎菌的毒素相关基因序列,还有待测定更多的菌系。

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