2013高考生物专项考能集训复习课件：微生物的培养与应用(人教版）.pptVIP

判断下列说法是否正确： 1．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源( ) 2．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数( ) 3．消毒和灭菌实质是相同的( ) 一、培养基及无菌技术 1．种类：液体培养基、固体培养基。 2．营养成分：一般都含有水、 、 、无机盐和生长因子。 3．无菌技术 消毒方法： 、巴氏消毒法和化学药剂消毒。 灭菌法：灼热灭菌、干热灭菌、 灭菌。 二、微生物培养的基本技术 1．配制培养基：称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。 2．灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。 1.高温无菌的原理是什么？ 提示：　高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活，从而达到灭菌的目的。 2．用酒精消毒时，为什么70%的酒精杀菌效果最好？ 提示：　浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。 三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成 ，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。 2．统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用 法。 3．实验流程：土壤取样→制备 →微生物的培养与观察→细菌的计数。 3．实验流程：土壤取样、 、梯度稀释、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生 的菌落。 3.分离微生物的方法有哪些？ 提示：　从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种： (1)利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使它成为一种加富培养基。 (2)利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，在数量上占优势。 1．微生物的营养：碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。 2．微生物培养的无菌技术 进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。 三种常用灭菌方法的比较： 3．微生物的纯化培养—平板划线法与稀释涂布平板法 1．下列关于微生物的培养与应用的叙述错误的是(　　) A．通过消毒不能杀死物体内所有的微生物 B．利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目 C．微生物所用的培养基的成分和植物组织培养所用的培养基的成分不同 D．平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物的接种 解析：　消毒是指杀死部分对人体有害的病原微生物，但不一定能杀死细菌的芽孢，故A正确；统计样品中活菌的数目要用稀释涂布平板法，平板划线法办不到，故B错误；不同的培养对象，所需的营养成分不同，培养基中所加入的物质就不同，故C正确；微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，故D正确。 答案：　B 2．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是(　　) A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 B．划线操作须在火焰上进行 C．在5区域中才可以得到所需菌落 D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌 解析：　本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。 答案：　D 1．筛选菌株 (1)原则：人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 (2)菌株筛选原理的比较 2.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 ③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 3.设置对照 (1)目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 (2)