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植物組織培養淺論 植物組織培養淺論 壹●前言 現在 ，生命科學這個領域愈來愈被重視 ，許多與謎一般的真相正等著我們去發 掘 ，科技的進步與技術的創新 ，使得生命科學的領域發展愈來愈迅速 ，雖然每個 研究與發現都是很困難與艱辛的，但是成果的分享與喜悅是屬於全世界的。而植 物組織培養只是生命科學這個領域的其中一門學問，或許外表看起來不是那麼令 人驚艷 ，但是這項科學卻改變了人們許多事物 ，一言難盡啊﹗ 而今天我們要探討的是植物組織培養的基礎——培養基。市面上出現了很多的試 管植物，有沒有想過怎麼做出來的呢? 而且生活週遭有很多的植物或是你吃的蔬 菜、水果都有可能是用組織培養所挑選出的優良品種，或許只是基因上的小小不 同，卻讓這個世界增添不少色彩 ，現在讓我們一起來了解其中的奧秘吧﹗ 貳●正文 一般進行植物組織培養需要在無菌操作台上進行。所有的器具，例如鑷子與培養 瓶 ，都需要在無菌箱裡經過殺菌消毒，避免欲培養的組織受到細菌和真菌的感 染，微生物的感染是培養失敗常見的原因。除器材之外，如果所要培養的植物組 織是來自一般室外種植的植株，那麼這些植物組織也需要以消毒水消毒。操作中 所使用的水 ，也是經過滅菌的無菌水。簡單一句話來形容 ，沒有細菌就有成功 ， 雖然這不完全是影響成敗的因素 ，但卻佔了絕大部分的關鍵 。 一、培養基的組成 提供植物生長所需的培養基 ，通常含有醣類、維生素、植物激素、大量元素與微 量元素、洋菜(Agar)等這些物質，而再來我們將一一介紹這些構成培養基的基礎。 1. 醣類 醣類是植物培養物不可缺少的碳源和能源。其中蔗糖是最好的碳源和能源，其次 是葡萄糖和果糖，在培養基中加入一定濃度的蔗糖，既可作碳源，又可維持一定 的滲透壓(一般在 1.5 大氣壓範圍內) 。因植物種類和培養物的不同，最適蔗糖濃 為1.5-2.0% 。癒傷組織與不定芽分化用量為3% ，花藥培養為3-12%等。 2. 維生素 1 植物組織培養淺論 植物培養物自身具有合成維生素的能力，但還不能滿足快速生長的需要。培養基 中添加維生素能使培養物健康快速地生長。維生素在植物培養物的生長中起看重 要作用。它們以 co-facter 的形式參與細胞的蛋白質、脂肪、糖代謝等重要生命 活動。添加到培養基中的維生素濃度約在0.1mg 至10mg 之間。培養基中添加的 維生素有毗喀醒、胭酸、硫胺素、生物素及泛酸鈣等，均屬 B 族維生素。 《註 一》 3. 植物激素 植物激素對於培養中的培植體的不定芽、不定胚、不定根、花芽等的分化 ，有著 重要而明顯的作用。 低濃度的生長素2,4-D 有利於胚狀體分化，但妨礙胚狀體進一步發育。萘乙酸有 利於單子葉植物的分化，IAA 誘導生根效果最佳。因此培養過程中，培養基應 根據不同植物的種、品種，不同的培植體，以及不同的培養目標，採用不同種類 的植物激素和不同配比，以便達到預期的目的。 《註二》 生長素最常用的有 2,4-D 、NAA 、IBA 、IAA 。而依作用強弱的次序為 2,4-DNAAlBAIAA 。 細胞分裂素常用的有KT 、BA 、(z)玉米素、2ip ，它們的作用強弱依次序為玉米 素2ipBAKT 。細胞分裂素具有促進細胞的分裂和分化、延遲組織的衰老、增 強蛋白質的合成、對抗頂芽優勢促進側芽生長等效果，且細胞分裂素還能顯著地 改變其他激素的作用。 《註三》 GA 通常不利於芽的分化，但能促進已分化的芽的伸長生長。ABA 、CEDP ，在 試管繁殖中較少使用。 4. 大量元素與微量元素 大量元素和微量元素通常以化合物的形式溶入培養基。 a. 大量元素 大量元素除碳、氫、氧元素外，尚有氮、磷、鉀、鎂、鈣、硫。它們是植物細胞 中構成核酸、蛋白質、酵素、葉綠體以及生物膜所必不可缺少的元素。在培養基 中常以NO 3 或Ca(NO 3 ) 2 的形式來滿足培養物對氮素的需要，也有以硝態氮為 2 植物組織培養淺論 主，補加(NH 4 ) 2 SO 4 ，滿足喜酸性植物的需要。例如，適用於蘭花莖尖與種子 萌發的培養基 Va