细菌药敏试验讲述.ppt

联合药物敏感试验 抗菌药物联合用药可出现4种结果： 无关作用：两种药物联合作用的活性等于其单独活性。 拮抗作用：两种药物联合作用显著低于单独抗菌活性。 累加作用：两种药物联合作用时的活性等于两种单独抗菌活性之和。 协同作用：两种药物联合作用显著大于其单独作用总和。 联合药物敏感试验 棋盘稀释法是目前临床最常用的定量方法，利用肉汤稀释法的原理，首先分别测定拟联合的抗菌药物对检测是菌的MIC，根据所得MIC确定药物稀释度（一般为6～8个稀释度），药物最高稀释度为其MIC值的2倍，依次对倍稀释。两种药物的稀释分别在方阵的纵列和横列进行，接种菌量为5×105cfu/ml,35孵育18 ～ 24小时后观察结果。计算部分抑菌浓度（FIC）指数。 联合药物敏感试验 FIC指数=A药联合的MIC/ A药单测MIC+ B药联合的MIC/ B药单测MIC。 判断标准： FIC指数，0.5为协同作用； 0.5 ~ 1相加作用； 1 ~ 2 无关作用； 2拮抗作用 厌氧菌体外药物敏感试验 由于厌氧菌感染多为内源性感染，厌氧菌对目前常用抗菌药物的敏感性较为稳定，加之厌氧菌培养要求特殊，临床试验室一般不做体外药敏试验。 厌氧菌药敏试验指征： 明确厌氧菌引起的严重感染， 已确诊的厌氧菌感染经验治疗未能奏效， 需长期用药的厌氧菌感染。 厌氧菌体外药物敏感试验 厌氧菌体外药敏试验有琼脂稀释法、肉汤稀释法、E试验和β内酰胺酶检测，其基本原理和方法与需氧菌相同，只是在培养基、操作环境和培养条件应根据厌氧菌的特定需求改变。 厌氧菌培养的气体条件：80%N2、10%H2和10%CO2，还需要加入冷催化剂钯粒和亚甲蓝指示剂。 厌氧菌体外药物敏感试验 * * 常规测试并报告的药物分组(2) 葡萄球菌 肠球菌 一级 苯唑西林，青霉素 青霉素，氨苄西林 二级 红霉素类 万古霉素 克林霉素，万古霉素 三级 氯霉素 庆大霉素 * * 常规测试并报告的药物分组(3) 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌 一级 氨苄西林，青霉素 青霉素，红霉素 复方磺胺 复方磺胺 二级 头孢呋肟，头孢噻肟 氧氟沙星，四环素 头孢他啶，氯霉素 万古霉素 三级 阿奇霉素，头孢克罗 氯霉素，利福平 环丙沙星，亚胺培南 利福平，四环素 * * 预报用药(一) 测试药 菌名 推测其他药物的敏感性 苯唑西林 葡萄球菌 所有β-内酰胺类 四环素 所有（除葡 多西环素，米诺环素 萄球菌和不 动杆菌〕 红霉素 G＋球菌 罗红霉素，克拉霉素， 阿奇霉素 克林霉素 所有 林可霉素 * * 预报用药(二) 测试药 菌名 推测其他药物的敏感性 氨苄西林 肠球菌 青霉素 青霉素G 葡萄球菌 氨苄西林，美洛西林 替卡西林 头孢噻吩 肠杆菌科 头孢拉定，头孢氨苄 头孢克罗 奈啶酸 肠杆菌科 所有氟喹诺酮类 万古霉素 所有 替考拉宁 以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基进行一系列不同倍数稀释（通常为双倍稀释），经培养后观察其最低抑菌浓度。 稀释法中用琼脂培养基者为琼脂稀释法，用肉汤培养基者为肉汤稀释法。 药敏试验-稀释法 常用抗菌药物容积稀释法 步骤 浓度 （mg/mL） 来源 体积(mL) CAMHB(mL) 最终浓度（mg/mL） 1 5120 储存液 1 9 512 2 512 步骤1 1 1 256 3 512 步骤1 1 3 128 4 512 步骤1 1 7 64 5 64 步骤4 1 1 32 6 64 步骤4 1 3 16 7 64 步骤4 1 7 8 8 8 步骤7 1 1 4 9 8 步骤7 1 3 2 10 8 步骤7 1 7 1 11 1 步骤10 1 1 0.5 12 1 步骤10 1 3 0.25 13 1 步骤10 1 7 0.125 原理： 聚乙烯板内含有各种稀释度的抗菌药物