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肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药现状 苏州大学附属第一医院 张险峰 一、碳青霉烯类药物 所有β-内酰胺类抗生素中 具有最广泛的抗菌活性 碳青霉烯类药物 对超广谱β-内酰胺酶表现出的稳定性 使其一直作为产酶株临床治疗的首选 药物，但随着碳青霉烯类药物的大量 使用，碳青霉烯类药物耐药的肠杆菌 科细菌也不断出现 二、 肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药机制 产碳青霉烯酶 产ESBL或AmpC酶伴外膜蛋白缺失 外排泵 碳青霉烯酶 水解底物覆盖包括碳青霉烯类在内 几乎所有的β-内酰胺类抗菌药物 碳青霉烯酶 A组 KPC GES B组 IMP VIM NDM-1 D组 OXA 碳青霉烯酶检测 改良 Hodge试验 EDTA抑制试验检测金属酶 碳青霉烯酶基因检测 产ESBL或AmpC酶伴外膜蛋白缺失 大肠埃希菌 OmpC OmpF 肺炎克雷伯菌 OmpK35 OmpK36和OmpK37 产ESBL或AmpC酶伴外膜蛋白缺失 外膜蛋白缺失仅仅使碳青霉烯类 药物的MIC升高，一般并不能达到 耐药折点，但合并产酶的情况就能 对碳青霉烯类产生高水平耐药 外排泵 敏感和耐药的菌株中均存在外排泵 基因，但只有当外排泵诱导表达增加 时才会产生耐药 三、碳青霉烯酶基因检测 收集菌株 2011年3月-2012年4月我院临床标本分离的碳青霉烯类抗生素耐药或敏感性降低（K-B法）肠杆菌科细菌 收集菌株 菌株使用Vitek 2 Compact鉴定菌种并测定厄他培南和亚胺培南的MIC值， 依据2010年CLSI怀疑产碳青霉烯酶 肠杆菌科菌株的初筛试验筛选菌株： 厄他培南MIC≥2ug/ml或 亚胺培南MIC≥2ug/ml 碳青霉烯酶基因检测 KPC-2 IMP VIM NDM-1 碳青霉烯酶基因检测 DNA 提取 PCR扩增 琼脂糖凝胶电泳 测序 碳青霉烯酶基因检测 14株肺炎克雷伯菌 4株大肠埃希菌 2株阴沟肠杆菌 1株产气肠杆菌 碳青霉烯酶基因检测结果 13株肺炎克雷伯菌都携带KPC-2基因（6株同时含有VIM基因，2株同时含有IMP基因），2株大肠埃希菌携带KPC-2基因，2株阴沟杆菌携带NDM-1和KPC-2基因，其余4株未检测到上述耐药基因 亚胺培南与厄他培南MIC（ug/ml）值及耐药基因检测结果 亚胺培南与厄他培南MIC（ug/ml）值及耐药基因检测结果 亚胺培南与厄他培南MIC（ug/ml）值及耐药基因检测结果 THANK YOU FOR YOUR ATTENTION * * KPC-2，VIM ≥8 ≥16 kpn006 KPC-2 ≥8 ≥16 kpn297 KPC-2 ≥8 ≥16 kpn014 KPC-2 ≥8 4 kpn989 - ≥8 ≥16 kpn457 KPC-2，VIM ≥8 8 kpn151 KPC-2 ≥8 ≥16 kpn134 耐药基因 厄他培南MIC 亚胺培南MIC 菌株编号 KPC-2，VIM ≥8 ≥16 kpn802 KPC-2，IMP ≥8 ≥16 kpn294 KPC-2 ≥8 ≥16 kpn677 KPC-2，VIM ≥8 ≥16 kpn648 KPC-2，VIM ≥8 ≥16 kpn326 KPC-2，VIM ≥8 ≥16 kpn315 KPC-2，IMP 4 2 kpn019 耐药基因 厄他培南MIC 亚胺培南MIC 菌株编号 - ≥8 4 eae941 KPC-2，NDM-1 ≥8 8 ecl 012 KPC-2，ND