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微波辅助法提取茶多酚研究 　　摘 要：该研究以过80目筛磨碎的茶粉为原料，以水为介质，用微波加热辅助提取的方法提取茶多酚，研究不同的微波功率、微波处理时间、预浸提时间及料液比条件对茶叶中茶多酚得率的影响，在单因素实验的基础上，通过正交实验优化微波提取茶多酚的实验条件，探究4个因素影响程度的大小。结果表明，在微波功率为396W，微波处理时间为180s，预浸提时间为75min，料液比为1∶45时，茶多酚的得率最高，达到9.73%。 　　关键词：微波辅助法；茶叶；茶多酚 　　中图分类号 S572 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）24-0026-04 　　饮茶已成为几千年来中国人的风俗[1]，现代研究表明茶叶中含有多种营养成分和药效成分，其中茶多酚含量丰富。茶多酚是一类多羟基酚类化合物[2]，为儿茶素类，另外还含有花色素、黄酮、酚酸、黄酮苷和缩酚酸等。茶多酚抗氧化性极强[3]，采用微波辅助法提取茶多酚时[4]，微波下的样品可以得到电磁波和偶极转动离子传导的热量被加热，同时微波可以对植物细胞的细胞壁施加压力[5]，从而使其细胞壁破裂，茶多酚就会从细胞中被释放出来。微波辅助提取茶多酚处理过程简单、效率高，且没有被污染的风险。 　　1 仪器与实验材料 　　1.1 实验仪器 752型紫外可见光分光光度计（上海光谱仪器厂），UV-1600PC紫外扫描可见分光光度计（上海翱艺有限公司）、布氏漏斗、循环水式真空泵（上海科升仪器有限公司），旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），真空冷冻干燥机（上海精科仪器公司），家用微波炉（格兰仕）。 　　1.2 实验试剂 茶多酚标准品（纯度98%）（购于中国药品制品检定所）。碳酸氢钠、氯化锌、乙酸乙酯、盐酸等均为市售分析纯。 　　1.3 实验材料 本次实验所用材料为过80目筛磨碎茶粉，由市场采购供茶叶，经样品粉碎机研磨后过80目筛，得到过80目筛磨碎茶粉，储存于真空干燥皿中，以使其保持干燥，随用随取。 　　2 实验技术路线 　　分别称取一定量的过80目筛的干燥茶粉于50mL锥形瓶中，加入一定量的蒸馏水，配制成一定的料液比浸提溶液。按照实验需要先进行预浸提，达到预浸提时间后进行微波加热处理，控制微波功率和微波处理时间。然后将微波加热后的样品去真空泵上进行减压抽滤得到抽滤液，得到的抽滤液根据中加入5%的碳酸氢钠溶液，以调节其pH值在7.0～8.5，然后加入ZnCl2沉淀剂，以使抽滤液中的茶多酚完全沉淀。茶多酚在碱性过强的溶液中会出现局部氧化的现象，待茶多酚完全沉淀后，从碱性环境中迅速脱离出来离心后取沉淀，在沉淀中加入足量的6mol/L盐酸，使沉淀完全溶解而得到酸化液，然后用相同体积的乙酸乙酯萃取所得酸化液，萃取后保留萃取相，脱溶剂后在真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥。去除水分后得到茶多酚成品，将所得到的茶多酚成品在感量为0.000 1g的电子天平上称重，计算茶多酚得率。 　　3 实验测定项目 　　3.1 茶多酚标准曲线的确定 用电子天平（感量为0.000 1g）准确称取茶多酚标准品0.100 0g于烧杯中，加蒸馏水溶解，然后转移至100mL的容量瓶中，用蒸馏水稀释定容至刻度。摇匀后取该溶液10.00mL转移至100mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。所得溶液即100mg/mL标准溶液。每组6个试管，共做3组平行实验，每组分别取0mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2mL配制好的标准溶液于试管中，用蒸馏水稀释到10mL。稀释后溶液的浓度分别为：4.0μg/mL、8.0μg/mL、12.0μg/mL、16.0μg/mL、20.0μg/mL。用UV-1600PC型紫外可见分光光度计对浓度为20.0μg/mL的溶液进行波长扫描。本次实验扫描波长范围为250～400nm，茶多酚-水扫描结果如图1所示。对茶多酚-水溶液进行紫外波长扫描的目的是为了确定以水为溶剂时，茶多酚-水溶液的最大吸收波长。由图1和表1可以看出，茶多酚-水溶液的紫外波长扫描结果为：只有一个波峰，即在273.2nm处有最大吸收峰。此处的吸光度值为0.456。 　　 　　[扫描波长范围（nm）＼检测模式＼序号＼波长（nm）＼吸光度（abs）＼透过率（%）＼能量＼亮能量＼暗能量＼增益＼250.0～400＼吸光度＼1＼273.2＼0.456＼35.0＼11612＼32935＼121＼4＼] 　　用752型分光光度计在波长273nm下，分别测定上述3组平行溶液的吸光度A，并求3组溶液的光度的平均值，绘制标准曲线，见图2。 　　3.2 不同单因素实验对茶多酚浸提率的影响 　　3.2.1 不同微波功率对茶多酚得率的影响 每组用电子天平分别取0.500g磨碎茶粉于3个50mL三角瓶中，用移液管加入2