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微波辅助法提取茶多酚研究.doc
微波辅助法提取茶多酚研究
摘 要:该研究以过80目筛磨碎的茶粉为原料,以水为介质,用微波加热辅助提取的方法提取茶多酚,研究不同的微波功率、微波处理时间、预浸提时间及料液比条件对茶叶中茶多酚得率的影响,在单因素实验的基础上,通过正交实验优化微波提取茶多酚的实验条件,探究4个因素影响程度的大小。结果表明,在微波功率为396W,微波处理时间为180s,预浸提时间为75min,料液比为1∶45时,茶多酚的得率最高,达到9.73%。
关键词:微波辅助法;茶叶;茶多酚
中图分类号 S572 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2016)24-0026-04
饮茶已成为几千年来中国人的风俗[1],现代研究表明茶叶中含有多种营养成分和药效成分,其中茶多酚含量丰富。茶多酚是一类多羟基酚类化合物[2],为儿茶素类,另外还含有花色素、黄酮、酚酸、黄酮苷和缩酚酸等。茶多酚抗氧化性极强[3],采用微波辅助法提取茶多酚时[4],微波下的样品可以得到电磁波和偶极转动离子传导的热量被加热,同时微波可以对植物细胞的细胞壁施加压力[5],从而使其细胞壁破裂,茶多酚就会从细胞中被释放出来。微波辅助提取茶多酚处理过程简单、效率高,且没有被污染的风险。
1 仪器与实验材料
1.1 实验仪器 752型紫外可见光分光光度计(上海光谱仪器厂),UV-1600PC紫外扫描可见分光光度计(上海翱艺有限公司)、布氏漏斗、循环水式真空泵(上海科升仪器有限公司),旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),真空冷冻干燥机(上海精科仪器公司),家用微波炉(格兰仕)。
1.2 实验试剂 茶多酚标准品(纯度98%)(购于中国药品制品检定所)。碳酸氢钠、氯化锌、乙酸乙酯、盐酸等均为市售分析纯。
1.3 实验材料 本次实验所用材料为过80目筛磨碎茶粉,由市场采购供茶叶,经样品粉碎机研磨后过80目筛,得到过80目筛磨碎茶粉,储存于真空干燥皿中,以使其保持干燥,随用随取。
2 实验技术路线
分别称取一定量的过80目筛的干燥茶粉于50mL锥形瓶中,加入一定量的蒸馏水,配制成一定的料液比浸提溶液。按照实验需要先进行预浸提,达到预浸提时间后进行微波加热处理,控制微波功率和微波处理时间。然后将微波加热后的样品去真空泵上进行减压抽滤得到抽滤液,得到的抽滤液根据中加入5%的碳酸氢钠溶液,以调节其pH值在7.0~8.5,然后加入ZnCl2沉淀剂,以使抽滤液中的茶多酚完全沉淀。茶多酚在碱性过强的溶液中会出现局部氧化的现象,待茶多酚完全沉淀后,从碱性环境中迅速脱离出来离心后取沉淀,在沉淀中加入足量的6mol/L盐酸,使沉淀完全溶解而得到酸化液,然后用相同体积的乙酸乙酯萃取所得酸化液,萃取后保留萃取相,脱溶剂后在真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥。去除水分后得到茶多酚成品,将所得到的茶多酚成品在感量为0.000 1g的电子天平上称重,计算茶多酚得率。
3 实验测定项目
3.1 茶多酚标准曲线的确定 用电子天平(感量为0.000 1g)准确称取茶多酚标准品0.100 0g于烧杯中,加蒸馏水溶解,然后转移至100mL的容量瓶中,用蒸馏水稀释定容至刻度。摇匀后取该溶液10.00mL转移至100mL的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。所得溶液即100mg/mL标准溶液。每组6个试管,共做3组平行实验,每组分别取0mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2mL配制好的标准溶液于试管中,用蒸馏水稀释到10mL。稀释后溶液的浓度分别为:4.0μg/mL、8.0μg/mL、12.0μg/mL、16.0μg/mL、20.0μg/mL。用UV-1600PC型紫外可见分光光度计对浓度为20.0μg/mL的溶液进行波长扫描。本次实验扫描波长范围为250~400nm,茶多酚-水扫描结果如图1所示。对茶多酚-水溶液进行紫外波长扫描的目的是为了确定以水为溶剂时,茶多酚-水溶液的最大吸收波长。由图1和表1可以看出,茶多酚-水溶液的紫外波长扫描结果为:只有一个波峰,即在273.2nm处有最大吸收峰。此处的吸光度值为0.456。
[扫描波长范围(nm)\检测模式\序号\波长(nm)\吸光度(abs)\透过率(%)\能量\亮能量\暗能量\增益\250.0~400\吸光度\1\273.2\0.456\35.0\11612\32935\121\4\]
用752型分光光度计在波长273nm下,分别测定上述3组平行溶液的吸光度A,并求3组溶液的光度的平均值,绘制标准曲线,见图2。
3.2 不同单因素实验对茶多酚浸提率的影响
3.2.1 不同微波功率对茶多酚得率的影响 每组用电子天平分别取0.500g磨碎茶粉于3个50mL三角瓶中,用移液管加入2
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