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生物仿生法制备羟基磷灰石色谱固定相及其在蛋白质分离上的应用.pdf
第26卷增刊 分析试验室 V01．26．Sup一．
2007年10月 of 20ar7—10
Otinese／oumal
A九a[ysisLab(Jratory
生物仿生法制备羟基磷灰石色谱固定相
及其在蛋白质分离上的应用
李烃，冯钰铸。
(武汉大学化学与分子科学学院，武汉430072)
高效液相色谱(ⅢM)法分离效率高、分析速 作为流动相时，能实现几种碱性蛋白质的分离。
度快、选择性好、样品回收简单，已成为蛋白质分 其缺点就是比表面积小，孔径难以控制。羟基磷
离分析不可或缺的方法之一。硅胶和氧化锆微球 灰石因其独特的生物相容性和生物亲和性成为蛋
是近几十年来应用最广的色谱基质材料。但是， 白质的分离材料，然而，它机械强度差，难以承受
硅胶在碱性介质(pH8)中不稳定，而且它上面残很高的装柱压力和流速。于是，我们希望制备一
留的硅羟基去质子化后易与蛋白质的氨基端发生 种新型的色谱填料，它同时具备良好的生物相容
非特异性吸附，因而限制了其在蛋白质分离方面 性和较高的机械强度，适用于HPLC中蛋白质的分
的应用。氧化锆化学稳定性良好，其表面存在着 离。
丰富的Lewis酸位点，用一定浓度的Lewis碱溶液
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al咖nat咿p11ic pH6．8，1mL／min；(b)KPpH
c
Peaks：1一BSA；2一Trypsin；3一RnaseA：4一Lysozyme；5一eytoehrome
本研究模仿人体骨骼生长的情况，室温条件 磷灰石晶体的存在，表面分析的结果也证明此种
下将色谱基质材料(硅胶或锆镁复合氧化物)于模 方法得到的材料适合用作高效液相色谱柱填料。5
拟体液(SBF)中浸泡数日，这样就会在无机基质材种蛋白质在羟基磷灰石包覆硅胶色谱柱(HAp-
料的表面沉积得到一层致密均一的羟基磷灰石晶
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