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衣原体Chlamydiae南华大学医学院吴移谋教授
第一节 概述 定义: 一类严格真核细胞内寄生,具有独特发育周期,并能通过细菌滤器的原核细胞型微生物,归属于细菌学范畴。 1.发育周期与形态染色 生活周期包括原体和始体两阶段 原体(elementary body) 1.形状:球形,0.2~0.4μm 电镜下:核质致密和少量核糖体 细胞壁坚韧 存在于细胞外 2.功能:(1)有很强的感染性(吸附) (2)发育成始体:吸附-被吞噬- 胞膜在原体周围形成空泡- 原体在空泡中增大-始体 始体(initial body) 1.形状:球形,较原体大(0.5~1.0μm), 无致密核质,有纤细网状结构--- 也称为网状体(reticulate body) 2.发育周期:原体--始体-空泡内- 二分裂-子代原体-包涵体(inclusion body)-原体成熟-释放-再感染 (48~72h) (无细胞外周期) 3.是繁殖型,无感染性 染色: 1.Macchiavello染色法或Giemsa染色法 原体:红色或紫色 始体:深蓝色 2.碘染色法:沙眼衣原体原体:褐色 (因包涵体含糖原) 原体和始体的比较 包涵体 (二)培养特性 鸡胚接种:6~8日龄鸡胚卵黄囊中繁殖,感染后3~6天致鸡胚死亡,并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒。 组织细胞培养:可在HeLa、McCoy或HL等各种传代细胞生长良好,可将接种有标本的细胞培养管离心沉淀以促使衣原体穿入细胞,在细胞培养管中加入代谢抑制物。 (四)抵抗力 热:敏感,60℃10min或37℃48h 寒冷:-50℃数年,液氮内可保存10年以上,冷冻 干燥保存30年以上仍可复苏。 化学消毒剂:0.5%石炭酸,24h 75%乙醇,半分钟, 紫外线照射可迅速灭活。 抗生素:利福平、四环素、红霉素、 磺胺敏感 青霉素:不敏感 (一)致病性 致病物质:内毒素相似的物质 致病机理:1.抑制细胞代谢,使细胞溶解 2. MOMP能阻止吞噬体与溶酶体融合,表位易变异,在体内可逃避特异性抗体的中和作用而继续感染细胞。 3. 热休克蛋白(HSP)能刺激机体巨噬细胞产生TNF-α、IL-1、IL-6等炎症性细胞因子。 所致疾病 1.沙眼(慢性传染性角结膜炎) 通过眼-手-眼途径直接或间接密切接触传播。由A、B、Ba和C血清型引起。早期流泪,后期结膜瘢痕、睑内翻、倒睫及角膜血管翳引起角膜损害,影响视力或致盲。 沙眼 衣原体发现 1956年汤飞凡等首次分离培养出沙眼衣原体,无可争辩地结束了半个多世纪关于沙眼病原的争论。他是世界上发现重要病原体的第一个中国人。 生物分型 沙眼生物型(Biovar trachoma) 性病淋巴肉芽肿生物型(biovar lymphogramuloma venereum, LGV) 2.包涵体结膜炎 婴儿结膜炎,引起急性化脓性结膜炎(包涵体脓漏眼),不侵犯角膜,能自愈;成人结膜炎可经两性接触、经手至眼或污染的游泳池水感染,引起滤泡性结膜炎,又称游泳池结膜炎,一般经数周或数月痊愈,无后遗症。 3.泌尿生殖道感染 沙眼生物型D~K血清型引起,男性多表现为非淋菌性尿道炎,并可合并附睾炎、前列腺炎、直肠炎等;女性表现为尿道炎、宫颈炎、输卵管炎与盆腔炎等。 4.婴幼儿肺炎 5.性病淋巴肉芽肿 侵犯男性腹股沟淋巴结,引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿,常形成瘘管;亦可侵犯女性会阴、肛门、直肠,引起会阴-肛门-直肠组织狭窄。 (一)直接涂片镜检 取结膜刮片,Giemsa或碘液及荧光抗体染色镜检,观察上皮细胞浆内有无包涵体。 (二)分离培养 取感染组织的渗出液或刮取物,接种于鸡胚卵黄囊或传代细胞,再用IFA或ELISA检测培养物中的衣原体。 (三)衣原体抗原与核酸组分检测 ELISA:检测沙眼衣原体LPS和MOMP PCR和LCR(链接酶链反应)等扩增技术检测沙眼衣原体DNA 预防重点是注意个人卫生,避免直接或间接的接触传染。 治疗药物选用强力霉素、罗红霉素、阿奇霉素
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