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兽医微生物学与免疫学
细菌的结构与生理
细菌是原核生物界的一大类单细胞微生物,个体形态可分为球菌、杆菌、螺形菌三类。
基础结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核体。
特殊结构:鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢。
多以二分裂方式进行无性繁殖,因每种细菌所具有的酶不同,利用生化反应可以鉴别不同种类细菌。细菌大小介于细胞与病毒之间,以微米(μm)为测量单位,适宜条件下,培养8~18h的形态较为典型。
细胞壁是细菌最外层结构,经高渗溶液处理使其与细胞膜分离,以革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阴性菌(G-菌)和革兰氏阳性菌(G+菌)。
G+菌 细胞壁较厚(20~80nm),由肽聚糖和穿插于其内的磷壁酸组成。肽聚糖(黏肽)为原核生物细菌特有,是构成细胞壁的成分,占G+菌细胞壁干重50%~80%,由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥组成。磷壁酸是G+菌特有成分,分为壁磷壁酸和膜磷壁酸,其抗原性较强,介导细菌对宿主细胞的黏附,或为噬菌体提供特异性的受体;
G-菌细胞壁较薄(10~15mm)除含肽聚糖,还有外膜和周质间隙,属于疏松薄弱的二维结构。
外膜由外膜蛋白、脂质双层、脂多糖组成。
外膜蛋白 外膜中镶嵌的多种蛋白质的统称,主要包括脂蛋白、微孔蛋白。微孔蛋白一般由3个相同分子质量的亚单位组成,形成跨越外膜的孔道,起分子筛选作用,仅允许小分子质量的物质通过,一些细菌的外膜蛋白也作为噬菌体、性菌毛、细菌素的受体。
脂质双层 结构类似细胞膜,阻止大分子物质进入菌体。
脂多糖 由类脂A、核心多糖、特异性多糖组成。是内毒素的主要毒性成分,能够导致动物体发热、白细胞增多,甚至休克、死亡。
G-菌外膜与细胞膜之间有2~3nm厚的间隙,占细胞体积20%~40%,称周浆间隙。在细菌获得营养、解除有害物质毒性等方面起重要作用。
细胞壁主要功能:
a 维持菌体固有形态。
b 与细胞内、外物质交换有关。
c 表面抗原决定簇。
d 与细菌的致病性有关。
当细菌受到某些理化因素或药物作用时,细胞壁被破坏或合成受到抑制,仍能够生长、繁殖、分裂,称为L型细菌。
细胞膜位于细胞壁内侧,为脂质双层并镶嵌有特殊功能蛋白质和酶类,不含胆固醇。主要功能:a具有选择通透性;b分泌胞外酶;c有多种呼吸酶;d细胞生物合成场所;
细胞质是细菌新陈代谢的主要场所。核糖体是游离与细胞质中的微小颗粒,由RNA和蛋白质组成。mRNA与核糖体结合并将核糖体串成多聚核糖体时,成为蛋白质合成的场所;质粒是细菌染色体外的遗传物质,为闭合环状双股DNA分子。常用作目的基因的运载体。
核体(拟核)是细菌染色体,由裸露的双链DNA堆积而成。
荚膜 菌体细胞壁外包绕的一层边界清楚的黏液样物质。大多数细菌荚膜为多糖(炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌为多肽),少数为透明质酸。主要功能:a抵御吞噬细胞的吞噬,增加细菌侵袭力;b具有特异性,可作为细菌鉴定及细菌分型的依据。
鞭毛 细菌表面细长而弯曲的丝状物,成分是蛋白质。可将有鞭毛的细菌分为单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。主要功能:a菌体运动;b具有特异的抗原性,统称为H抗原;
菌毛 大多数G-菌、少数G+菌表面遍布,比鞭毛细而短的丝状物,成分是蛋白质,电子显微镜下可观察到。可分为普通菌毛、性菌毛。
普通菌毛:一种黏附结构,与细菌致病性有关。
性菌毛(F菌毛):由质粒携带的致育因子(F因子)编码,与细菌的接合、F质粒的转移有关,菌毛分六个型,其中2型(F2)为性菌毛。
芽孢 细菌一定条件下胞质脱水浓缩形成的多层膜包裹、通透性低的圆形或椭圆形小体。芽孢的形成不是细菌的繁殖方式,而是休眠体,抵御不良环境的特殊存活形式。杀灭芽孢的方法:160℃干热灭菌或高压蒸汽灭菌。(炭疽杆菌芽孢为卵圆形,破伤风杆菌芽孢为圆形。)
革兰氏染色法:草酸铵结晶紫染色1min→水洗后加碘液染1min→95%乙醇脱色30s→用稀释的石碳酸复红或沙黄复染1min后水洗→干后镜检;G-菌革兰氏染色为红色,G+菌革兰氏染色为紫色。(“大红大紫”联想记忆);大多数G+菌对溶菌酶、青霉素、头孢菌素、龙胆紫等敏感。大多数G-菌对链酶素、庆大霉素、卡那酶素、新酶素等敏感。
瑞氏染色法:滴加瑞氏染色液1~3min→再加等量的中性蒸馏水或缓冲液,轻晃玻片→3~5min后直接水冲洗→吸干后镜检。细菌染成蓝色,细胞核呈蓝色,组织细胞的胞浆呈红色。
抗酸染色法:滴加较多石碳酸复红染色液→以酒精灯火焰微加热至产生蒸汽→3~5min后水洗,用3%盐酸酒精脱色→水洗后用碱性美蓝染色液复染1min→水洗吸干后镜检。抗酸性细菌(结核分枝杆菌)呈红色,非抗酸性细菌呈蓝色。
细菌生长繁殖基本条件
营养物质:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子
酸碱度:大多数细菌最适pH为7.2~7.6
温度:大多数细菌最适生长温度为37℃
气体:主要有氧气和二氧化
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