气相色谱法--研究生.pptVIP

色谱分析 -----研究生 主讲 赵怀清 第五节 分离条件的选择 一、分离度（分辨率）及影响因素 二、实验条件的选择 一、分离度及影响因素 （一）分离度定义式 （二）影响分离的因素 （一 ）分离度定义式 讨论： （二）影响分离的因素 1.柱效项及其影响因素： 影响色谱峰的宽窄 主要取决于色谱柱性能及载气流速 续前 讨论： 增加柱效是提高分离度的一个直接有效手段 提高柱效、改善分离的途径：增加柱长；降低板高 根据速率理论，降低板高、提高柱效的方法是： 1）采用粒度较小、均匀填充的固定相（A项↓ ） 2）分配色谱应控制固定液液膜厚度（C项↓ ） 3）适宜的操作条件： ①载气的流速和种类 在低流速时（0～u最佳），B/u项起主导作用，因此选用分子量较大的载气，如N2、Ar，可使组分的扩散系数较小，从而减小分子扩散的影响，提高柱效。 在高流速时（u），u越大，Cu项越大，B/u项越小，此时Cu项起主导作用，因此选用分子量较小的气体，如H2、He作载气，可以减小气相传质阻力，提高柱效。 填充柱，N2的最佳实用线速度为10cm/s~12cm/s；H2为15cm/s ~20cm/s。 ②柱温 选择原则是：在使难分离物质对能得到良好的分离，分析时间适宜，并峰形不拖尾的前提下，尽可能采用低柱温。具体柱温按试样沸点不同而选择： a.高沸点混合物（300℃~400℃）：柱温可低于沸点100℃~150℃，可采用低固定液配比（1%~3%），高灵敏度检测器。 b.沸点300℃的试样：柱温可比平均沸点低50℃至平均沸点的温度范围内选择。固定液配比为5%~25%。 c.宽沸程试样：采取程序升温方法。 举例说明程序升温与恒定柱温分离沸程为225℃的烷烃与卤代烃9个组分的混合物的差别。 图19-8（a）为恒定柱温Tc=45℃，记录30min只有5个组分流出色谱柱，但低沸点组分分离较好。 （b）为Tc=120℃，因柱温升高，保留时间缩短，低沸点成分峰密集，分离度降低。 （c）为程序升温。由30℃起始，升温速度为5℃/min。使低沸点及高沸点组分都能在各自适宜的温度下分离。因此峰形、分离度都好。 增加柱长对分离有利。一般填充柱柱长2m~4m。柱内径常用4mm~6mm。 分离度随n增加而增加，在塔板高度不变的条件下，n与柱长L成正比，因此 3. 其它条件的选择 ① 气化室温度 选择气化温度取决于试样的沸点，稳定性和进样量。 一般可等于试样的沸点或稍高于沸点， 气化室温度应高于柱温30℃～50℃。 ② 检测室温度 检测室温度需高于柱温，至少等于柱温。 ③ 进样时间和进样量 进样速度必须很快，在1s以内。 试样一般进样0.1μl～2μl。 (2) 提高α和k α和k决定于试样中各组分本身的性质，以及固定相和流动相。 在气相色谱中， α和k主要受固定相性质和柱温的影响； 在高效液相色谱法中， α受溶剂种类影响；在溶剂组成确定后， k主要由溶剂的配比所左右。 分配系数比α反映了固定液的选择性，α越大，表明固定液的选择性越好。当α=1时，无论柱效有多高，R都为零，两组分不可能分离。α越大，R越大。 改变α和k值的方法 ①改变固定相，使各组分的分配系数有较大的差别。 例如 分离苯和环己烷，若以邻苯二甲酸二壬酯作为固定液，α值为1.5； 以β,β-氧二丙腈作为固定液，α值增加到6.3。 ②改变柱温 柱温的改变，对不同组分的分配系数不同。采用较低柱温，有利于增大α值。 ③ 改变流动相的性质和组成。 图示 练习 如何根据具体情况改进分离度？ 练习 例：已知物质A和B在一根30.0cm长的柱上的保留时间分别为16.40和17.63min，不被保留组分通过该柱的时间为1.30min， 峰底宽为1.11和1.21min，试计算 （1）柱的分离度（2）柱的平均塔板数（3）塔板高度 （4）达1.5分离所需柱长 续前 第六节 定性定量分析 一、定性分析 1．利用保留值定性 1）已知对照物定性 2）相对保留值定性 3）利用保留指数定性 2．利用化学反应定性：收集柱后组分，官能团反应定性鉴别（非在线） 3．利用两谱联用定性：GC-MS，GC-FTIR 二、定量分析： （一）峰面积的测量 （二）定量校正因子 （三）定量方法 以峰高或峰面积定量 （一）峰面积的测量 1．对于正常峰 2．非正常峰（不对称峰） （二）定量校正因子 1．两种表示方法 续前 2．相对校正因子的测定 3