归一化法内标法外标法.docVIP

归一化法 normalization method??一种常用的色谱定量方法。归一化法是把样品中各个组分的峰面积乘以各自的相对校正因子并求和，此和值相当于所有组分的总质量，即所谓“归一”，样品中某组分i的百分含量可用下式计算：pt%= Aifi/(A1f1+A2f2 + ....Anfn )*100式中f1、f2、fn… 为各组分的相对校正因子，A1、A2、…An为各组分的峰面积。如果操作条件稳定，也可以用峰高归一化法定量，此时组分i的百分含量可按下式计算： pt%= hifi/(h1f1+h2f2 + ....hnfn )*100 式中f1、f2、fn、…为各组分在该操作条件下特定的峰高相对校正因子，h1、h2、…hn为各组分的峰高。用归一化法定量时，必须保证样品中所有组分都能流出色谱柱，并在色谱图上显示色谱峰。 定量方法 色谱中常用的定量方法有： 校正归一化法 当试样中各组分都能流出色谱柱且在检测器上均有响应，各组分的相对校正因子已知时，可用此法定量。组分i在混合物中的百分含量可由下式计算： 其中fi可为质量校正因子，也可为摩尔校正因子。若各组分的定量校正因子相近或相同（如同系物中沸点接近的组分），则上式可简化为： 该法简称为归一化法。校正归一化法的优点是：简便、准确，当操作条件如进样量、流速变化时，对定量结果影响很小。缺点是：对该法的苛刻要求限制了该法的使用。该法适合于常量物质的定量。 内标法 所谓内标法是将一定量的纯物质作为内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测物和内标物的质量及在色谱图上相应的峰面积比，求出某组分的百分含量。当只需测定试样中某几各组分时，而且试样中所有组分不能全部出峰时，可用此法。此法适合于微量物质的分析。该法的计算公式如下： 其中，fsi是被测组分相对于内标物的相对校正因子。 该法的优点是：受操作条件的影响较小，定量结果较为准确，使用上不象归一化法那样受到限制。该法的缺点是：每次分析必须准确称量被测物和内标物，不适合于快速分析。 内标物的选择十分重要。它应该是试样中不存在的物质；加入的量应接近于被测组分色谱；同时要求内标物的色谱峰位于被测组分色谱附近或几个被测组分色谱峰的中间，并与这些组分完全分离；内标物必须不与样品发生反应等。 外标法（定量进样－标准曲线法） 所谓外标法就是应用被测组分的纯物质来绘制浓度c对响应值A（h）的标准曲线，然后测试被测样品中被测组分的响应信号（峰面积或峰高），由标准曲线即可查出或通过线型回归计算出其百分含量。 该法必须定量进样，即测定标准曲线和测定未知物时，进入色谱中的样品量必须一致。该法的优点是：操作简单，计算方便，缺点是：结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。 当被测试样中各组分的浓度变化范围不大时（如工厂的中间控制分析）可不必绘制标准曲线，而用单点校正法。即配制一个与被测组分含量十分接近的浓度为CS的标准溶液，定量进样，由下式计算被测物的含量。 关于归一化法的一些问题？？ 归一化法中的校正因子如何得到？？？ 如果不做，采用面积归一化法的误差大吗？？ 一般那么多的校正因子不可能一一测出呀？？ 可以估算吗？？ 归一化法中的校正因子是通过配制与样品相同组分的标准品求出的。 如果不做相对校正因子，采用面积归一化法的误差大小取决与被测各组分在检测器上的单位质量的应答值大小，比如FID检测器测苯和甲烷不用相对校正因子，测定结果会相差哟5倍，2-甲基戊烷和3-甲基戊烷测定结果会相同。 个别的小峰不能定性的用临近的峰校正因子代替。 内标法 internal standard method??是色谱分析中一种比较准确的定量方法，尤其在没有标准物对照时，此方法更显其优越性。内标法是将一定重量的纯物质作为内标物（参见内标物条）加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和被测组分的峰面积（或峰高）及相对校正因子，按下列公式即可求出被测组分在样品中的百分含量：? ?? ?? ?? ? Ai fi Ws? ?? ?Wi %=-----------------100% ? ?? ?? ?? ? As fs W式中Wi %为被测组分的百分含量；Ai ，As分别为组分和内标物的峰面积；fi，fs分别为组分和内标物的相对校正因子；Ws为内标物的重量；W为样品的重量。 内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。选择内标物有4个要求：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置