实验三 rbc计数hb测定.pptVIP

实验三 红细胞计数 血红蛋白测定 要求 通过实验熟练掌握毛细血管采血技术，细胞计数板的结构及用法掌握红细胞计数的原理，方法和临床意义。掌握Hb测定的实验原理和操作方法 一、毛细血管采血法 实验步骤 1.酒精消毒无名指头 2.待酒精挥发（疼痛与稀释），皮肤干燥后，左手拇、食指、中指固定病人无名指端，右手持采血针，迅速穿刺指端。 3.擦去第1d血（有组织液稀释与易凝），用采血管采集需要血量 4.擦净采血管外周的血液（量准确），并尽快将采血管插入已备好的稀释液中，挤出血液到底部，并利用上清洗涤采血管3次，混匀。 4.采血完毕，以消毒干棉球压迫伤口，帮助止血。 （1）血红蛋白吸管的使用 1.吸管的构造 2.使用　拇指与中指握橡皮头，食指堵住橡皮头上的小窟窿，压迫皮头吸样（吸时手要缓缓放开，否则血会吸入橡皮头中），吸到需要量时（或稍多）时，将吸管的吸样端抵紧指端皮肤，放开压迫的橡皮头，将吸管擦净后放入试管底部，用上清洗涤吸管3次） （2）计数板的使用 　 （3）计数顺序与原则 1.按一定顺序计数　 2.压线细胞 数上不数下 数左不数右 (4)显微镜的使用 1.打开光圈，低倍镜下调节光源到合适亮度，然后关闭光圈到最小。 2.将计数板放到载物台上，低倍下找到刻度线，高倍视野下计数。 二、红细胞计数 原理 将红细胞稀释后高倍视野下计数，然后换算成每升血液中红细胞的数量。 1.操作 1.先吸取红细胞稀释液2ml. 2.末梢采血法采血10微升加入稀释液中. 3.混匀后，静置10分钟 4.充池到计数板中，静置5分钟 5.计数中间大方格四个角上和正中的五个中方格。 6.结果计算 公式：HBC/L=数得的细胞数*5*10*200*106 2.注意事项 1.采第一滴血要擦去，因含组织液（稀释作用和促凝）； 2.吸样要准确，不能气泡，管外余血要擦掉； 3.血红蛋白吸管要清洗干净； 4.充池要先混匀，充池不能有气泡，否则要重新充池； 二、Hb测定 原理： 高铁氰化钾可将Hb氧化成高铁Hb,然后高铁Hb可与CN-络合，形成棕红色的氰化高铁血红蛋白。 操作： 5ml氰化试剂+20ul末梢血，混匀静置10min，然后540nm比色。 Hbg/L= A/(44*1.000cm)*64458mg/1000*251 =A*367.7 3.参考值与临床意义 RBC 成年男性　　（4.0~5.5）×1012/L 成年女性　　（3.5~5.0）×1012/L 新生儿　　　（6.0~7.0）×1012/L Hb 成年男性：120~160g/L; 成年女性：110~150g/L; 新生儿：170g~200g/L;　 老年人（70岁以上）：男性：94~122g/L; 女性：87~112g/L。 红细胞和血红蛋白增高 生理性增高 病理性增高: 相对性增多 原发性红细胞增多症 继发性红细胞增多症 红细胞和血红蛋白减低 生理性减低 病理性减低:红细胞丢失过多 红细胞破坏增加 造血原料不足 骨髓造血功能减退 * LOGO