生化技术实验考试重点.docVIP

721分光光度计 构成 5个基本部件：光源、单色器、吸收池、检测器和测量仪表 原理 溶液中的物质在光的照射激发下产生对光吸收的效应，不同的物质都具有其各自的吸收光谱，在一定条件下当某单色光通过溶液时，其吸收程度与该物质的浓度成正比，且入射光越强、溶液浓度越大、液层厚度越厚时，溶液对光的吸收越多，它们之间的关系符合朗伯-比尔定律 理论基础 朗伯-比尔定律：讨论吸收光能与溶液浓度和溶质层厚度之间的关系的基本定律 I：透过光强度 I0：入射光强度 T：透光度 T=I/I0 百分透光度（T%）=T×100 透光度的负对数为吸光度 A=lgT=lgI/I0 A=kbc k：比例常数（吸光系数） c：浓度 b：液层厚度 实验项目 波长校正 线性检查 杂光检查 比色皿的质量检查 重复性检查 对721分光光度计进行一些机械调整，改变光源与单色器的相对位置，使其处于同一直线上，保证波长读数与通过样品的波长符合，确保仪器的最大灵敏度。 线性误差：表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系，出现正或负偏离的现象 原因：(是溶液本身不符合比尔定律（化学偏离） (仪器本身各种因素的影响（仪器偏离） 凡检测器感受到的不需要的辐射都称为杂光。 杂光的来源有：①仪器本身的原因②室内光线过强而漏入仪器，仪器暗室盖不严；③样品本身的原因 材料：玻璃、石英或荧石制成 光径：1.0cm或0.5c