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实验一酪蛋白实验一酪蛋白
牛奶中酪蛋白的分离纯化 实验一 实验目的 掌握 等电点沉淀法 从牛奶中提取酪蛋白的原理和操作 实验原理 酪蛋白是牛奶中主要的蛋白，浓度约3.5g/100ml 酪蛋白是一类含磷蛋白质的混合物 酪蛋白的等电点约是pH4.8,不溶于乙醇 沉淀酪蛋白 除去沉淀中的脂质 材料与试剂 牛奶 0.2mol/L乙酸钠缓冲液，pH 4.6 无水乙醇 0.2mol/L乙酸/乙酸钠缓冲液的配制 ? pH (18℃) 0.2?? mol/L NaAc (毫升) 0.2?? mol/L HAc (毫升) ? pH (18℃) 0.2?? mol/L NaAc (毫升) 0.2?? mol/L HAc (毫升) 2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60 操作步骤 水浴加热牛奶和乙酸钠缓冲液至40℃ 取25ml预热的牛奶至烧杯中，缓慢加入25ml乙酸钠缓冲液，轻轻混匀，静置10分钟左右 滤布过滤，收集沉淀 将滤布和沉淀物放入一个小烧杯中，加入10ml无水乙醇，用玻棒将沉淀物充分打散呈细沙状 再用10ml无水乙醇重复上一步操作一次 用滤纸吸干乙醇，打散沉淀 操作步骤 置于80℃烘箱中干燥（约20分钟） 感观评价酪蛋白的质量 用天平称重 操作步骤 实验结果与分析 1 感官评价酪蛋白的质量 2 用天平称重，计算酪蛋白的得率 * 注意：玻棒打散沉淀物一步是实验成败的关键步骤，目的是为了将脂质充分除去。 * 注意：玻棒打散沉淀物一步是实验成败的关键步骤，目的是为了将脂质充分除去。
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