生物实验中试剂的作用及实验方法总结.doc

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生物实验中试剂的作用及实验方法总结生物实验中试剂的作用及实验方法总结

生物实验中试剂的作用及实验方法总结   一、化学物质的检测方法   ①淀粉——碘液 (蓝色)   ②还原性糖——斐林试剂\班氏试剂(砖红色)   ③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)   ④乳酸——pH试纸   ⑤O2——余烬复然   ⑥蛋白质——被蛋白酶水解 、双缩脲试剂(紫红色)   ⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液 (橘黄色)、苏丹Ⅳ染液 (红色)   ⑧DNA——二苯胺(蓝色)   ⑨染色体——龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液   二、实验条件的控制方法   1、加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物   2、减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水   3、除去容器中CO2——NaOH溶液   4、除去叶中原有淀粉——置于黑暗环境   5、除去叶中叶绿素——酒精水浴加热   6、除去光合对呼吸干扰——给植株遮光   7、如何得到单色光——棱镜色散或透明薄膜滤光   8、血液抗疑——加入柠檬酸钠   9、线粒体提取——细胞匀浆离心   10、骨无机盐的除去——盐酸溶液   11、灭菌方法——培养基用高压蒸汽灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂冼净,擦干后用75%酒精消毒;实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌;整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。   三、实验结果的显示方法   ①光合速度——O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量   ◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率;   ◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;   ◆植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。   ②呼吸速度——O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量   ③原子或分子转移途径——放射性同位素示踪   ④细胞液浓度大小——质壁分离   ⑤植物细胞是否死亡——质壁分离   ⑥甲状腺激素—动物耗氧量,发育速度等   ⑦生长激素—生长速度(体重、体长变化)   ⑧胰岛素作用—动物活动状态   ⑨菌量—菌落数,亚甲基蓝褪色程度   四、实验中控制温度的方法   1、还原糖,DNA鉴定——沸水浴加热   2、酶促反应——水浴保温   3、用酒精溶解叶中的叶绿素——酒精要隔水加热、   4、细胞和组织培养以及微生物培养——恒温箱培养   五、实验中常用器材和药品的使用   1、NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH   2、Ca(OH)2:鉴定CO2   3、CaCl2提高细菌细胞壁的通透性   4、HCl:解离或改变溶液的pH   5、NaHCO3:提供CO2   6、NaCl:配制生理盐水或用于提取DNA   7、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基的凝固剂   8、亚甲基蓝:用于检测污水的细菌含量   9、酒精:用于消毒、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液   10、蔗糖:测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原、作为碳源和能源物质   11、滤纸:过滤或纸层析   12、纱布、尼龙布:过滤,遮光   13、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色   14、柠檬酸钠——血液抗凝剂   六、一些常见的实验方法   ⑴、根据颜色来确定某种物质的存在:   淀粉 I2(蓝色);还原性糖 斐林试剂(砖红色);脂肪 苏丹Ⅲ(橘黄)或 苏丹Ⅳ(红色);蛋白质 双缩脲试剂(紫色);   大肠杆菌 伊红和美蓝(菌落为深紫色,有金属光泽)   ⑵、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。   ⑶、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性   ⑷、同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源; 光合作用中二氧化碳的去向; 噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质; DNA的复制是半保留复制。   ⑸、确定某种元素为植物生长必需的元素的方法: 水培法(完全培养液与缺素完全培养液对照)   ⑹、获得无籽果实的方法: 用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄、 诱导染色体变异,如无籽西瓜。   ⑺、确定某种激素功能的方法: 饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。   ⑻、确定传入、传出神经的功能: 刺激 观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。   ⑼、植物杂交的方法 雌雄同花:花蕾期去雄 套袋 开花期人工授粉 套袋 雌雄异花:花蕾期雌花套袋 开花期人工授粉 套袋   ⑽、确定某一显性个体基因型的方法: 测交; 该显性个体自交。   ⑾、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法: 具有一对相对性状的纯合体的杂交 自交,观察后代是否有性状分离。

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