SUMO-1与PML-NBs-上海交通大学医学院精品课程.doc

SUMO-1与PML-NBs 茆臻贞 李稻 上海交通大学医学院 病理生理学教研室 05级硕士 摘要：SUMO-1作为一个修饰因子，主要作用是翻译后的调控，对基因表达及基因组的稳定性具有意义。SUMO-1可共价修饰PML蛋白，是后者定位到NB的前提。SUMO-1修饰的PML-NBs能够进一步招募其他蛋白质，从而调节其功能，其中SUMO可以作为PML/p53通路中的一种调节蛋白。当PML作为转录催化因子与p53结合时，会抑制肿瘤细胞生长，并激活p53的促凋亡活性。另外，GFP-SUMO-1的过表达能阻止PML-NB的微结构形成，其原因是从PML修饰中转变成了SUMOylation形式，从而SUMO-1在调节PML核体的完整性上起了重要作用。本文主要综述了SUMO-1与PML及PML-NBs的关系。 关键词：SUMO-1 PML PML-NBs 近年来关于SUMO 家族中的SUMO-1的修饰、调控功能的研究很多，其中对于它在参与PML的翻译和修饰过程以及介导PML在细胞内定位的机制已经比较清楚了。然而SUMO-1对PML-NB（或POD）的功能和关系尚不清楚，为此人们就这个问题进行了一系列的实验研究。一旦SUMO-1与PML-NB关系以及PML-NB的功能被研究清楚后，必将对某些癌症的治疗起到一定推动作用。 一、SUMO-1修饰与生物学效应 SUMO-1 （small ubiquitin-related modifier 1）为101个氨基酸组成的多肽，人SUMO-1与泛素的氨基酸序列有48%同源性，同源序列位点为22～97。目前已知，哺乳动物的SUMO家族成员有：SUMO- l、SUMO-2、SUMO-3和SUMO-4。SUMO-1具有家族成员共同特性：C端均有一个向外伸展的突出端；但不同SUMO家族成员突出端的氨基酸序列是不同的，而泛素则没有这一突出端[1]。 SUMO-1修饰调节过程可分为：成熟，激活，缀合，连接这四个主要步骤。SUMO-1的修饰调节需要3个关键酶：活化酶（E1）、结合酶（E2）、连接酶（E3）的参与。①成熟阶段：在类泛素蛋白底物结合酶（Ulp）作用下，SUMO-1前体蛋白暴露出C端的Gly，由此前体蛋白向成熟蛋白转变，这也是SUMO-1修饰调节的必经之路。②激活阶段：由Aos1和Uba2构成的异源二聚体E1，通过消耗ATP，与SUMO-1的C端Gly以非共价键形成腺苷酸化的SUMO-1中间体（在中间体内SUMO-1与Uba2的活性Cys残基形成硫酯键而被活化）。③缀合阶段：活化的SUMO-1分子从E1的Uba2亚单位转移到E2的Ubc9上， Ubc9（ubiquitin-conjugating enzyme 9）的活性位点Cys93残基借助硫酯键相连形成SUMO-Ubc9（Ubc9是一种核蛋白，它既可定位于核孔复合物（NPC）胞浆侧，也可定位于核质侧）。④连接阶段： SUMO-1的Gly在E3作用下，与靶蛋白Lys残基的ε-氨基通过异肽键结合。E3的作用是促进SUMO-1与靶蛋白的特异性结合[1]。 SUMO-1在经过由三个酶的修饰后，与靶蛋白共价连接，并参与蛋白质与蛋白质之间的相互作用，调控靶蛋白在细胞内的分布。其主要机制是通过阻碍泛素对靶蛋白的共价修饰，提高靶蛋白的稳定性。此外，SUMO-1还参与DNA的复制修复以及转录调控过程[2]。 二、PML蛋白和PML-NBs PML-NBs（Promyelocytic Leukemia nuclear bodies）首先被描述在一系列急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia，APL）的研究中，由于染色体易位，PML基因与RARα（retinoic acid receptor α ）基因共价融和在t（15:17）上而成为PML-RARα复合体，从而提出了PML-NBs的概念[3]。 PML属于一个庞大的蛋白质家族。PML的氨基酸序列中含有一个“环指”结构，并有两个富半胱氨酸区（称为B-box结构）和一个卷曲螺旋结构域（coiled-coil domain）总称RBCC或TRIM 结构域（TRlpartite motif）[4、5]。这样氨基酸序列结构提示，PML和PML-NB在控制基因组的稳定和DNA修复方面有着一定的联系。PML蛋白有3个Lys残基为SUMO修饰的位点，SUMO-PML复合体可调控多种蛋白，如转录抑制因子（Daxx:death domain associated protein）、促进p53蛋白进入NBs，抑制Daxx生成或增强p53的转录活性等。另外，PML蛋白还被认为能为NBs结构募集其它蛋白，以维持NBs结构的稳定[6]。 研究表明，APL中PML蛋白与NBs有着密切的联系，因为