番外編いろいろな電気泳動.ppt

補足：分子量の求め方 SDS－PAGEの泳動像から分子量を推定するには？ SDSの分子量マーカーに使用される代表的なタンパク質 分子量算出の手順～バンドが綺麗に揃ったゲルの場合～ 分子量算出の手順～スマイリングしたゲルや別のゲルで比較する場合～ SDSで分子量を測定する上での注意点 * タンパク質のバンドの移動距離を、分子量が既知のタンパク質の ものと比較することで、目的のタンパク質の分子量を算出できる 同じゲルの中で既知のタンパク質（分子量マーカー）を泳動する 分子量マーカーのバンドの移動距離を測り、分子量と対応する 移動距離を片対グラフにプロットする これを検量線として目的のバンドの移動距離から分子量を求める １）分子量マーカーの各バンドの位置を明確にし、分離ゲルの上端からの 移動距離を正確にはかる 分子量マーカー サンプル 44.6mm 33.5 23.6 12 .7 6.7 3.6 ２）片対グラフの横軸（普通目盛）に移動距離、縦軸（対数目盛）に分子量　　をとり、分子量マーカーの各バンドの値をプロットする ３）移動度－分子量標準曲線を求める ４）目的のバンドの位置を明確にし、移動距離を正確にはかる ５）その数値を３）で求めた標準曲線の式（y＝267249ｘ－0.7341）に代入し 　 分子量を算出する 分子量マーカー サンプル 28.5mm 267249