23第二十三章免疫细胞及其功能检验技术研讨.ppt

未转化淋巴细胞 转化的淋巴母细胞 转化率（％） ＝ 转化的淋巴细胞数 计数的淋巴细胞总数 X100％ 培养液 3H-TdR PHA 淋巴细胞 抗凝全血 分离液 离心 过滤 测量放射性 3H-TdR掺入法 灵敏度高 客观性好 原理： 外周血T细胞 PHA 发生增殖 MTT 含蓝色甲颗粒 的T细胞 MTT PHA 有机溶剂 测吸光度（A）值 计算SI判定细胞增殖结果 (SI≧2具有意义) MTT法 操作简便 无放射污染 51Cr释放法 淋巴细胞（CTL） + 含51Cr 的肿瘤细胞 肿瘤细胞破坏 51Cr 释放 测定γ射线 CTL介导的细胞毒试验 原理 根据T细胞活化的双识别原理，用生物工程技术将MHC分子在体外组装，并结合抗原表位肽，形成抗原肽-MHC分子复合物，结合流式细胞仪定量检测抗原特异性T细胞。 T MHC-抗原肽四聚体技术 MHC-肽四聚体技术 淋巴细胞内细胞因子检测 实验原理: 用刺激剂体外激活淋巴细胞，用蛋白转运抑制剂如莫能霉素阻止细胞因子分泌到细胞外，细胞内蛋白质转运方式被打乱，引起细胞因子向高尔基体积聚，用流式细胞仪测定淋巴细胞内的细胞因子种类，确定Th1/ Th2细胞的百分率。 分泌的细胞因子 Thl Th2 IL-2