GC5-色谱条件选择-定性定量.pptVIP

第五节 色谱条件的选择 色谱分离方程及范氏方程指导选择色谱条件的选择。 一. 色谱柱的选择 （固定液的配比 ，柱长，柱直径，液膜厚度等等） 1.1 固定液的配比 ：高沸点样品，最好采用低配比； 低沸点样品，宜用高配比 。 1.2 柱长的选择 柱长选择以使组分能完全分离，方法是选择一根极性适宜，任意长度的色谱柱，测定两组分的分离度，然后根据基本色谱分离方程式，确定柱长是否适宜。 ［例 ］在一根1m长的色谱柱上测得两组分的分离度为0.68,要使它们完全分离以(R=1.5),则柱长应为多少？解 即在其他操作条件不变的条件下，色谱柱长要选择5m左右才能使分离度达R=1.5,组分达到完全分离。 二． 温度的选择 (柱温,气化室,检测器) (1) 柱温 是一个重要的操作参数，直接影响分离效能和分析速度。 提高柱温可使气相、液相传质速率加快，有利于降低塔板高度，改善柱效，但增加柱温同时又加剧纵向扩散，从而导致柱效下降。 柱温一般较样品中各组分的平均沸点低一些。 选择柱温要兼顾几方面的因素。一般原则是： 在使最难分离的组分有尽可能好的分离前提下，采取适当低的柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。 另外，柱温的选择还应考虑固定液的使用温度，柱温不能高于固定液的最高使用温度。 。 对于宽沸程的多组分混合物，采用程序升温法。分析过程中按一定速度提高柱温，随着温度上升，组分由低沸点到高沸点依次分离出来 （2）气化室温度 气化温度一般较高于样品沸点，但要防止气化温度太高造成试样分解。 （3）检测器温度 一般要高于柱温30~50 °C 三个温度的关系 (柱温,气化室,检测器)： 三 .载气及其流速的选择  当u较小时，分子扩散项B/u是影响板高的主要因素，选择相对分子质量较大的载气（N2，Ar），以使组分在载气中有较小的扩散系数。 当u较大时，传质阻力项Cu起主导作用，选择相对分子质量小的载气(H2,He)，使组分有较大的扩散系数，减小传质阻力，提高柱效。 4. 载气的选择 载气应用最多是H2、N2和He气： H2 特点：分子量小，热导系数大，粘度小，在TCD上常用做载气；在FID上做燃气； N2特点：分子量大，扩散系数小，除了TCD外，其它检测器多用做载气. 氦气与H2性质类似，但安全，价贵 四．进样量的选择 最大允许进样量应控制在使半峰宽基本不变，而峰高与进样量成线性关系。如果超过最大允许进样量，线性关系遭破坏。 一般说来，色谱柱越粗、越长，固定液含量越高，容许进样量越大。 第六节 定性分析方法 气相色谱法定性分析主要依据是保留值，所以需要标准样品。而且单靠色谱法对每个组分进行鉴定，往往不能令人满意。 1.用已知纯物质对照定性 是气相色谱定性分析中最方便，最可靠的方法。这个方法基于在一定操作条件下，各组分的保留时间是一定值的原理。如果未知样品较复杂，可采用在未知混合物中加入已知物，通过未知物中哪个峰增大，来确定未知物中成分。 对照法 2．根据相对保留值定性 3．与其他方法结合 GC-MS、GC-IR、发射光谱等仪器联用是目前解决复杂样品定性分析最有效工具之一。 GC-MS 第七节 定量分析 依据：被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比。 因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常情况是采用峰面积进行定量分析。 一.峰面积测量方法 峰面积测量的准确与否直接影响定量结果。对 于不同峰形的色谱峰采用不同的测量方法。 （1）对称形峰面积的测量——峰高乘半峰宽法 理论上可以证明，对称峰的面积 A=1.065×h×W1／2 （2）不对称峰面积的测量——峰高乘平均峰宽法 A=1/2h（W0.15＋W0.85） 式中W0.15和 W0.85分别为峰高0.15倍和0.85倍处的峰宽。 现代色谱仪器一般具有数据处理软件（工作站），可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。 二 .定量校正因子