【名师金典】考生物一轮复习（基础知识整理+重难点聚集）专题2 微生物的培养与应用课件 新人教版选修1.pptVIP

　　一、微生物的培养 　　1.培养基  　　（1）概念：人们按照微生物对 营养物质 的不同需求，配制出的供其 生长繁殖 的营养物质。 　　（2）成分：尽管培养基的配方各不相同，但其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐 。还需满足不同微生物生长对 pH 、特殊营养物质以及氧气的要求。 　　（3）培养基配制的程序：计算→称量→溶化→ 调pH→灭菌→倒平板。 2.无菌技术 　　3.微生物培养的基本技术 　　（1） 纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个菌落，会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落 。菌落是鉴定菌种的重要依据。 （2）微生物的纯化培养方法（两种接种方法） 　　4.菌种的保藏　 　　（1）临时保藏：放入4℃冰箱，保存3～6个月，转入新的培养基。 　　（2）长期保存：甘油管藏法，放在-20℃冰箱保存。 　　二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 　　1.分离原理：土壤中能够分解尿素的细菌体内能合成脲酶，能够把尿素分解成无机物供细菌生长繁殖。 　　2.过程：土壤取样→ 制备培养基→微生物的培养与观察→细菌的计数。 　　3.细菌的计数：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。 　　三、分解纤维素的微生物的分离　 　　1.纤维素酶的组成：纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 　　2.分离原理：土壤中的能够分解纤维素的微生物体内具有纤维素酶，能够把纤维素分解成葡萄糖，供微生物生长发育。 　　3.鉴别方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 培养基的种类及微生物的培养 　　1.培养基配制的程序及注意事项 　　（1）程序：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。 　　（2）注意事项： 　　①全程要求无菌操作。 　　②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶来估计培养基温度。 　　③平板需倒置：平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 　　④操作时使锥形瓶的瓶口通过火焰，通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 　　（3）培养基内所需的其他条件：①pH；②特殊营养物质，如：在培养基中添加维生素；③氧气的含量，如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。 2.培养基的种类 （1）按培养基的物理性质划分 （2）按培养基的功能划分 　　a.加入培养基的凝固剂（琼脂），一般不能被微生物利用，仅仅起到凝固作用。 　　b.选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物，鉴别培养基可以鉴别特定的微生物，也可以存在其他微生物。 　　3.微生物的纯化培养（两种接种方法） 　　（1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离。 　　①原理：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 　　②无菌操作：在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环。第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种。 　　③注意事项：划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 　　（2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离。 　　①原理：细菌的数目随着稀释倍数增加而逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 　　②无菌操作：所有操作都应在火焰附近进行，对涂布器等接种器具进行消毒和灭菌。 　　③统计实验结果：选取菌落数介于30～300个之间的平板进行计数。每一个稀释度下至少涂布三个平板作为重复组，不同稀释度下涂布的平板形成对照组。 　　a.在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。 　　b.不同细菌的菌落特征不同，菌落是鉴定菌种的重要依据。 　　　某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 　　（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 　　　　和　　　　。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是　　　　和　　　　。 　　（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是　　　　。 　　（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于　　　　　　　中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种　　　　　　作为对照进行实验。 　　（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有　　　　　种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越　　　　。