SSR分子标记技术在茄子杂交种子纯度鉴定中的应用.pdfVIP

第52卷第8期 2013年4月 湖北农业科学 Hubei A朗cuhural Scjences V01．52 No．8 Apr．，2013 SSR分子标记技术在茄子杂交种子纯度鉴定中的应用 张 敏，谈太明，徐长城，谈 杰，黄树苹，王春丽 (武汉市蔬菜科学研究所，武汉430345) 摘要：利用SSR分子标记技术进行种子纯度鉴定是一种准确快速、简单高效的方法。试验选用100对引 物在鄂茄子2号亲本间进行PCR扩增．从中筛选出的3对引物SMl7、SM29、SM51在双亲本间能够扩增 出差异互补的条带。利用这3对引物对鄂茄子2号杂种一代群体进行纯度鉴定，鉴定结果为97．1％；与同 批次种子的田间鉴定结果(96．1％。鉴定地点海南岛)接近，说明应用SSR分子标记技术实施茄子杂种一 代种子的纯度鉴定是可行的． 关键词：茄子：SSR分子标记技术；种子纯度；鉴定 中图分类号：S641．1；Q503；S339．3+l 文献标识码：A 文章编号：0439—8114(2013 J08—1959一04 AppUcation of SSR Moleclllar Markers Technique in Purity Identmcation of．S『D肠忍Hm mP如啊妒，搬Hybrid Seed ZHANG Min，TAN Tai—ming，XU ChaIlg-cheng，TAN Jie，HUANG Shu—piⅡg，WANG Ch岫一H (WuhaJl Vegetable Research Institute，Wuhan 430345，China) Abstract： It is a kind of accumte， mpid， simple and emcient method by using SSR molecular markers for ident击cation of the seed purity． 100 pairs of SSR primers were screened for polymorphic ampli6cation between the parental 1ines of Js02伽，um 凇如，zgen口L．cv．E—Qiezi No．2．Among those primers， 3 pairs of primers，SM 17，sM29 and SM5 l，amplified specific bands di仃brent fbm either of the parents．The 3 pairs of primers were used to analyze the purity of S me幻n98，m L．cV．E—Qiezi No．2．The results showed the seed purity waLs 97．1％， and was very similar to field obsenration (Hainan Island identmcation 96．1％)，indicating t}lat using SSR molecular markers for purity identification of eggplant hybrid seed waLs feasible． Key words：50f∞“m me肠，t舻，m L； SSR molecular markers technique； seed p—ty； identification 种子纯度鉴定是种子质量保证的关键环节，直 接影响到作物的产量和品质。传统的种子鉴定方法 主要有种子形态鉴定法、幼苗鉴定法和田间小区种 植鉴定法?，这些方法不仅需要较多的土地、劳力与 财力，而且很容易受到环境因素的干扰．同时鉴定 结果的准确性往往不高[2．31。简单重复序列(Simple sequence repeat，SSR)是近年来发展起来的一种 DNA分子遗传标记技术．该技术采用聚合酶链式反 应(Polvmerase chain reaction．PCR)完成检测．所需 的DNA样品量少．对DNA质量要求也不高．加之 SSR呈共显性遗传，可鉴别杂合子与纯合子：并且多 态性丰富、重复性好、结果稳定可靠]．因而受到普 遍欢迎，应用的农作物种类不断增加。SSR技术既有 限制性内切酶片段长度多态性技术(Restriction fbgment len疹h polymo叩hism，RFLP)的稳定性高和 共显性强的优点[6．]．又比随机扩增的多态性DNA 标记技术(Randomly amplifiled polymorphic DNA， RAPD)成本低、技术简单[10]．所以在种子纯度鉴定 中的应用非常广泛，已在水稻(0懈o s越劫口L．)‘