专题2微生物培养与应用专题复习表解.docxVIP

专题2　微生物培养与应用　专题复习表解知识整合一、培养基1.定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质――培养基。2. 培养基的类型及其应用：标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离,鉴定,计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加（或缺少）某种化学成分菌种的分离3.微生物培养基中的营养水无机盐碳源氮源生长因子概念供给微生物碳素营养的物质能被微生物吸收利用的含氮物质某些微生物生长所必需的少量物质来源磷酸盐、硫酸盐、钾、钠、钙、镁、铁等盐类无机碳:CO2、NaHCO3等有机碳源：糖类（最常）、脂肪酸、花生粉饼、石油等无机氮源：N2、氨、铵盐、硝酸盐等有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉等维生素、氨基酸、碱基、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液（肝脏浸出液、麦芽汁）作用微生物细胞的组成成分，溶解物质，生物化学反应的介质为微生物生长繁殖及其一系列生命活动提供不可缺少的矿质元素要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物；异养微生物的主要能源物质主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。一般是酶和核酸的组成成分。说明不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大，而且微生物对碳源的需求量最大。异养微生物：含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源微生物之所以要补充生长因子，往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限?4.微生物营养类型营养类型主要或唯一碳源能源代表菌光能自养型CO2光能蓝藻化能自养型CO2无机物硝化细菌化能异养型有机物有机物大肠杆菌5.培养基的配制原则：①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。二、无菌技术1.无菌技术的内容(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触2.消毒和灭菌的区别?条?件结?果能否消灭芽孢和孢子常用方法消毒较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物不能煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法等灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物能?高压蒸汽灭菌法干热灭菌法灼烧灭菌法3.常见消毒灭菌方法比较方 法操作过程应用范围?消??毒煮沸消毒法100℃煮沸5～6min日常生活中广泛使用巴氏消毒法60～80℃下处理15～30min牛奶、啤酒、果酒和果酱等不宜进行高温消毒的液体化学药物消毒法用体积分数为70～75%的乙醇、碘酒涂抹，石碳酸或煤酚皂溶液喷洒等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等紫外线消毒法30W紫外灯照射30min接种室空气??灭??菌灼烧灭菌法酒精灯火焰灼烧微生物接种工具如接种环、接种针或其它金属用具等，接种过程中试管口活锥形瓶瓶口等干热灭菌法干热灭菌箱160～170℃加热1～2h玻璃器皿（如吸管、培养皿等）、金属用具等凡是不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品。高压蒸汽灭菌法100kPa、121℃维持15～30min培养基及多种器材、物品4. 原理：在高温高压、化学药剂、强酸强碱作用下，使微生物蛋白质凝固变性，从而达到杀菌的目的。三、微生物的纯化培养技术——平板划线法与稀释涂布平板法方法平板划线法稀释涂布平板法注意事项(1)接种环的灼烧①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物②之后每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者(2)灼烧接种环之后，要待接种环冷却后再进行取种，以免温度太高杀死菌种(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连(4)划线时用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破(1)稀释操作：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离酒精灯火焰1～2 cm处(2)涂布平板①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精目的在固体培养基上形成由单个细菌繁殖而来的子细胞群体——菌落培养平板冷凝后倒置培养，使培养基表面水分更好地挥发，防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染四、实验操作1.微生物培养、分离、计数和鉴定比较?大肠杆菌纯化培养土样中分解尿素的细菌的分离与计数分解纤维素微生物的分离??????