扫描探针刻蚀技术可控构建牛血清白蛋白纳米结构.pdfVIP

第37卷 2009年6月 分析化学(FENXI HuAxuE) 研究简报 Chine8e Joumal of AnalyIical Chemistry 第6期 884～887 扫描探针刻蚀技术可控构建牛血清白蛋白纳米结构 周化岚+ 施文健 (上海理工大学城市建设与环境工程学院，上海200093) 摘 要 利用Dip呻en纳米刻蚀技术(简称DPN技术)在云母基底上构建出形状、尺寸可控的牛血清白蛋白 (BsA)纳米结构。考察了针尖接触基底时间及针尖下行距离对构建的牛血清白蛋白纳米结构的影响。较长 的针尖．基底接触时间及较深的下行距离可以沉积更多的牛血清白蛋白分子，构建牛血清白蛋白纳米结构的 形状除了与墨水分子的本身性能有关，还与墨水-基底的相互作用有关。这些形状及尺寸可控的蛋白质纳米 结构可以作为模板，进行金属、半导体等其它材料的组装，有望用于制造光电纳米器件及生物纳米器件。 关键词纳米结构，牛血清白蛋白，扫描探针刻蚀技术，纳米器件 1 引 言 在纳米尺寸上可控地进行功能化分子的排列在实现器件微型化、元件纳米化的过程中起关键作用。 纳米科技的出现为研究纳米尺寸范围内物理和化学基本现象和理论提供了可能，同时也提供了新的平台 技术，为纳米器件和纳米传感器等的发展开辟了一条崭新的道路。近年来，基于扫描探针显微镜的一系列 纳米操纵技术得以迅速的发展。扫描探针技术已经用于对表面进行不同的化学、物理和电学的修饰¨。1。 1999年，“纳米笔”刻蚀技术(Dip—pen Nanolifhography，DPN)问世∞1。DPN技术是一种直接书写的 扫描探针刻蚀技术，由美国西北大学的Mirkin小组提出，它直接使用原子力显微镜(AFM)针尖为“笔”， 固体基底为“纸”，以与固体基底具有一定化学亲和力的分子为“墨水”。通过原子力针尖和基底之间的 毛细作用可以将针尖上的分子传递到基底表面上。DPN技术通过控制针尖运动可以在合适基底上获 得不同分子的纳米结构。“墨水”分子通过针尖和基底之间的水膜可以从针尖传递到基底上。DPN技 术已经成为一种在基底表面构建纳米结构的很有潜力的工具，其优点是简单、快速，可以用于多种材料 纳米结构的表面构建¨“?。 本实验采用扫描探针刻蚀技术直接将牛血清白蛋白传递到了云母表面，通过控制针尖的运动，可以 获得不同排列的牛血清白蛋白的纳米结构。同时考察了针尖下行的距离及停留时间对形成蛋白质结构 的影响。此种尺寸、形状可控的牛血清白蛋白纳米结构的成功构建，为进一步深刻了解其生物作用提供 了研究途径，通过定位表面结合，有望进行生物识别控制。 2 实验部分 NanoⅢa多功能原子力显微镜(美国Veeco公司)。牛血清白蛋白(Albumin，Bovine Senlm，BSA， Mw=68000，华美科技公司)，以新剥离的云母片为基底。所有成像和DPN操作都是在接触模式下进行 的。采用si，N。针尖，弹性常数为0．05 N／m。将si，N。针尖浸泡于BsA溶液中30 s后取出，在N：下吹 干，这样就可将BSA分子修饰到针尖表面，从而形成DPN实验的“墨水源”。DPN实验在20℃及相对 湿度55％的条件下进行。实验用水为去离子水。 3结果与讨论 3．1 BSA方块状纳米结构的构建 牛血清白蛋白是血液的主要成分(3．8 g／L)，分子量68 kD。等电点4．8。含氮量16％，含糖量 0．08％，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有O．2％。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸 2008．10．27收稿；2008·12-22接受 本文系上海市教委优秀青年教师基金(No．571061)及上海理工大学博士启动费(No．10D607)资助项目 · E—majJ：hu—an—zhou@hotmail．com 万方数据 第6期 周化岚等：扫描探针刻蚀技术可控构建牛血清白蛋白纳米结构 885 组成17个二硫键，在肽链的第34位有一个自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其它小分子物 质结合。图l给出了利用DPN技术获得的牛血清白蛋白方块的AFM图像及截面分析。从截面分析可 以知道，方块排列的高度约为0．95 nm。由于所施加的针尖效应，高度略小于牛血清白蛋白分子大小。 从图l可见，在云母表面形成了致密的牛IIIL清白蛋白薄膜，而在周边出现不规则斑点，这是由“墨水”分 子本身的性能决定的。牛血清白蛋白具有极好的水溶性，且在云母表面扩散较快，从针尖传递下来的分 子除了绝大部分的“墨水”分子-BSA外，在一定湿度下还有极少部分水分子的存在，水分子挥发就会在 图像周边形成如上述斑点状。至于中间部分致密的牛血清白蛋白薄膜，是由于携带BsA分子的“墨水 笔”在巾间反复扫描得到的。 图l 牛血清白蛋白方块状的AFM图像及截面分析 Fig．1 AFM image