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GB791841987化妆品微生物标准检验方法绿脓杆菌
中华 人 民 共 和 国 国 家标 准
化妆品微生物标准检验方法 绿 脓 杆 菌
UDC 668.58:576 .85.07
GB 7918. 4一 87
Standard methods of microbiological
examination for cosmetics Pseudomonps aeruginosa
绿脓杆菌在自然界分布甚广,空气、水、土壤中均有存在。对人有致病力,常引起人皮肤化脓感染,特别是烧伤、烫伤、眼部疾病患者被感染后,常使病情恶化,并可引起败血症,因此,在化妆品卫生标准中规定不得检出绿脓杆菌。
1 方法提要
根据本菌生物学特征:革兰氏阴性杆菌,氧化酶阳性,能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶,还原硝酸盐为亚硝酸盐,在42℃条件下生长等,可与类似菌相区别。
2 培养墓和试剂
2. 1 SCDLP液体培养基 见GB7918. 1- 87《化妆品微生物标准检验方法 总则》。 2.2 十六烷三甲基澳化馁培养基 成分:牛肉膏 3g 蛋白陈 log 氯化钠 5g 十六烷三甲基澳化按 0. 3g 琼脂 20g 蒸馏水 1000m1 制法:除琼脂外,将上述成分混合加热溶解,调PH为7. 4-7. 6,加入琼脂,115 C (101b) 20min灭菌后,制成平板备用。 2. 3 乙酞胺培养基 成分: 乙酸胺 10. Og 氯化钠 5. 0g 无水磷酸氢二钾 1. 39g 无水磷酸二氢钾 0. 73g 硫酸镁(MgS O,·7H, O) 0. 5g 酚红 0. 012g 琼脂 20g 蒸馏水 1000m1 制法:除琼脂和酚红外,将其他成分加到蒸馏水中,加热溶解,调PH为7. 2,加入琼脂、酚红,121 C
中华人民共和国卫生部 1987一05一28批准 1987一10一01实施
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GH 7918. 4一 87
(15 lb)20 min高压灭菌后,制成平板备用。 2.4 绿脓菌色素测定用培养基 成分: 蛋白陈 20g 抓化镁 1. 4g 硫酸钾 108 琼脂 18g 甘油(化学纯) log 燕馏水 l000ml 制法:将蛋白陈、抓化镁和硫酸钾加到蒸馏水中.加温使溶解,调州 至7.4.加入琼脂和甘油,加热溶解,分装于试管内,115C (10 1b)20 min高压灭菌后,制成斜面备用。 2. 5 明胶培养基 成分: 牛肉膏 39 蛋白陈 5g 明胶 120g 蒸馏水 1000ml 制法:取各成分加在燕馏水中浸泡20min,随时搅拌加温使溶解,调pH至7. 4,分装于试管内,经115C (10 1b) 20 min灭菌后,直立制成高层备用。 2.6 硝酸盐蛋白陈水培养基 成分: 蛋白陈 log 酵母浸青 3吕 硝酸钾 2g 亚硝酸钠 0. 5g 燕馏水 loooml 制法:将蛋白陈和醉母浸膏加到蒸馏水中,加温使溶解,调pH为7.2,煮沸过滤后补足液量,加入硝酸钾和亚硝酸钠,溶解混匀,分装到加有小倒管的试管中,115C (10 1b) 20 min灭菌后备用。 2.了 普通琼脂斜面培养基 成分: 蛋白陈 log 牛肉青 3g 抓化钠 5g 琼脂 15g 蒸馏水 loooml 制法:除琼脂外,将其余成分溶解于燕馏水中,调叫 为7.2-7.4,加入琼脂,加热溶解,分装试管,121C (15 1b) 15 min高压灭菌后。制成斜面备用。
3 仪器
3.1 3.2
3. 35.43.
144
培养箱:37C .42 C。锥形烧瓶。试管。灭菌平皿灭菌刻度吸管显微镜。载玻片。接种针、接种环。
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GB 7918. 4一 87:.{。电炉。高压消毒锅。
4 操作步吸
4.1 增菌培养:取1:10样品稀释液l Oml加到90mlSCDLP液体培养基中,置37℃培养 18-24
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