南海海洋微生物混合培养标书讲义.doc

项目编号： 广州中医药大学中药学院课题设计大赛 申 请 书 项目名称 一种南海软珊瑚共生菌的抗肿瘤菌株的筛选及其培养条件优化的研究 项目负责人 专业班级 指导教师 单 位 联系电话 申请日期 项目类别： ■ A 中医药类 □ B 社会科学类 广州中医药大学中药学院 二O一一年 四 月 作品名称 一种南海软珊瑚共生菌的抗肿瘤菌株的筛选及其培养条件优化的研究 项目负责人 性 别 出生年月 学 历 （）A本科生 B 大专 类别 （）A个人作品 B集体作品 学 院 专业 年 级 学 制 入 学 时 间 指导老师 学号 联系方式 合 作 者 情 况 姓 名 性别 所在单位（学院、专业、年级、学号） 学历 年龄 作者签名 此项删除 摘要 （限400字） 目的：从一种南海软珊瑚共生菌中筛选出一株抗肿瘤活性最强的菌株，并利用正交实验法优化培养条件，以提高次级代谢产物含量和抗肿瘤活性。 方法：用不同抑菌剂将软珊瑚共生菌进行分类培养，纯化分离出海洋细菌、放线菌和真菌，用MTT分析法对各培养液进行抗肿瘤活性测试，选择一株抗肿瘤活性最高的菌株，采用分子生物学进行形态鉴定，并命名为“ZZCL菌株，同时采用正交实验法对其培养条件进行优化设计。对发酵产物运用萃取，薄层色谱，正相、反相硅胶柱色谱等化学分离纯化手段进行分离，继而利用理化性质和波谱学（UV、MS等）等方法确定生物活性物质的化学结构。结果：通过实验筛选出了抗肿瘤活性最强的一株菌株，同时确定出产生物活性物质的化学结构及最佳培养条件。 项目的立项依据（附参考文献） 研究意义与存在问题 肿瘤是细胞异常增生所形成的，目前全球每年的癌症患者达1270万人癌症死亡者为760万人,因其很多具有抗肿瘤活性，备受科学家的重视。 海洋生物活性物质的研究是自20世纪60年代开始，然而海洋微生物活性物质的研究相对比较缓慢，只有零星的来自海洋微生物的活性物质被报道[2]，对软珊瑚的研究也有同样的情况，大部分研究还是针对其体内的次生代谢产物。另外，现有的研究较少有探讨培养条件的变化对生物活性物质相关作用的影响。 故本文选取一种南海软珊瑚，分离纯化其共附菌，筛选出抗肿瘤活性最强的菌株，并用正交试验确定最佳培养条件，更好地挖掘海洋微生物分离抗肿瘤活性物质的潜力 肿瘤是一类古老的疾病，早在2000-3000年前，国内外已有关于肿瘤的记载。肿瘤是细胞异常增生所形成的，根据肿瘤的生物学行为可以分为良性，恶性及交界性肿瘤，良性肿瘤一般生长缓慢，与周围正常组织之间有明显的界限，常有完整的包膜，也不向外扩散侵入正常组织，不会发生转移，仅对周围组织产生挤压，通常预后效果较好，一般不会导致患者死亡，而恶性肿瘤生长迅速，呈浸润性生长并侵犯周围组织，瘤体质地一般较坚硬，多无包膜，常会发生血道和淋巴道的转移或者种植于胸腔、腹腔及盆腔等处，手术后常会复发。生物学介于良性和恶性之间的肿瘤为交界性肿瘤，我们常说的癌事实上是恶性肿瘤的一种，在社会生活中，是所有恶性肿瘤的俗称和统称，医学上指的是上皮组织的恶性肿瘤，约占恶性肿瘤的90%，另外一种恶性肿瘤是肉瘤，它来源于间叶组织/淋巴造血和神经组织等，约占恶性肿瘤的10%。 肿瘤的产生和发展是一个多因素作用，多因素参与，经过多阶段才形成的生物学现象，不同的研究阶段提出了不同的学说。目前为止，被学术界肯定并沿用的学说主要有三阶段学说、两次突变学说、多阶段学说和干细胞起源学说。不过近些年研究比较多的是肿瘤干细胞理论，也有研究证实，正常组织器官存在一定数量的干细胞，它具有潜在的自我更新和分化能力，而正常组织干细胞与恶性肿瘤细胞有着极其相似的生长调控机制，肿瘤的发生与组织干细胞有着密切联系