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剖析化学高效液相色谱—hplc

温 度:10~30℃; 相对湿度:80%; 最好是恒温、恒湿 远离高电磁干扰、高振动设备,有良好的通风设施 工作原理: 手柄位在Load位置时,用微量进样针将样品从进样孔注射进入定量环中(定量环充满后,多余样品从放空孔排出) 手柄转动至Inject位置时,阀与液相流路接通,由泵输送的流动相冲洗定量环,将样品进入色谱柱中进行分析 手柄转动要快速:手柄处于Load和Inject之间时,由于暂时堵住了流路,流路中压力骤增,再转到进样位,过高的压力在柱头上引起损坏,应尽快转动阀,不能在中途停留 样品必须过滤:用0.45(0.22)μm的滤膜过滤 防止微粒阻塞进样阀 减少对进样阀的磨损 进样结束冲洗进样器: 用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗, 在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗 再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧 2. 泵的保养 使用流动相尽量要清洁 进液处的砂芯过滤头要经常清洗 流动相交换时要防止沉淀 避免泵内堵塞或有气泡 每次分析结束后,要反复冲洗进样口,防止样品的交叉污染 在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动色谱柱 当色谱柱和色谱仪联结时,阀件或管路一定要清洗干净 要注意流动相的脱气 避免使用高粘度的溶剂作为流动相 进样样品要提纯;严格控制进样量 3. 紫外灯的保养 在分析前应先平衡色谱柱,差不多后,再开检测器; 在分析完成后马上关闭检测器 K越大,溶质的离子与离子交换剂的相互作用愈大,保留值愈大 磺酸型阳离子交换树脂,阳离子的保留值大小: 一价阳离子:Cs+Rb+K+NH4+Na+H+Li+ 二价阳离子:Ba2+Pb2+Sr2+Ca2+Cd2+Cu2+Zn2+Mg2+ 强碱性阴离子交换树脂,保留值大小顺序: PO43-SO42-C2O42-I-HSO4-NO3-CN-NO2-Cl- HCOO-OH-F-CH3COO- Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 流动相 H2O、H2O + 乙醇、H2O + pH 缓冲剂 应用 无机离子,有机和生物酸碱。如氨基酸、核酸、蛋白质等 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 4. 尺寸排阻色谱法 size exclusion chromatography SEC 凝胶过滤色谱: 水为流动相 gel filtration chromatgraphy GFC 凝胶渗透色谱: 非水流动相 gel permeation chromatography GPC 1959年?Porath和Flodin发明 分离原理: 试样分子的尺寸和形状不同来实现分离 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. GPC 流动相: 水、四氢呋喃 应 用: 聚合物的分级 生物聚合体(蛋白质,核酸,低聚糖, 多肽)的分离 Evaluation only. Created with Aspose.S

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