高中生物 62 dna片段的扩增 pcr技术课件 中图版选修1.ppt

DNA分子双螺旋结构模型提出之后，人们又去探究DNA是如何传递遗传信息的。当时推测可能有如图A所示的三种方式。1958年，Meslson和Stah 1用密度梯度离心的方法，追踪由15N标记的DNA亲本链的去向，实验过程是：在氮源为14N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为14N—DNA(对照)，在氮源为15N—DNA的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA均为15N—DNA(亲代)，将亲代大肠杆菌转移到含14N的培养基上，再连续繁殖两代(子代Ⅰ和子代Ⅱ)后离心得到如图B所示的结果。 能力展示 图A 图B 请依据上述材料回答下面的问题。 (1)如果与对照相比，子代Ⅰ离心后能分辨出轻和重两条密度带，则说明DNA传递遗传信息的方式是________。如果子代Ⅰ离心后只有1条中等密度带，则可以排除DNA传递遗传信息的方式是________。如果子代Ⅰ离心后只有1条中等密度带，再继续做子代Ⅱ的DNA密度鉴定：①若子代Ⅱ离心后能分出中、轻两条密度带，则可以确定DNA传递遗传信息的方式是________。②若子代Ⅱ离心后不能分出中、轻两条密度带，则可以确定DNA传递遗传信息的方式有________的可能。 (2)他们观测的实验数据如下： 梯度离心DNA浮力密度(g/mL)表： 世　代 实　验 对　照 亲代 1.724 1.710 子Ⅰ代 1.717 1.710 子Ⅱ代 (1/2)1.717，(1/2)1.710 1.710 子Ⅲ代 (1/4)1.717，(3/4)1.710 1.710 分析实验数据可知：实验结果与当初推测的DNA三种可能复制方式中的________方式相吻合。 答案　(1)全保留复制　全保留复制　①半保留复制　 ②分散复制　(2)半保留复制 标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是 (　　)。 A．95 ℃、55 ℃、72 ℃ B．72 ℃、55 ℃、95 ℃ C．55 ℃、95 ℃、72 ℃ D．80 ℃、55 ℃、72 ℃ 1. 解析　当温度上升到90 ℃(90～96 ℃)以上时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到50 ℃(40～60 ℃)左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到72 ℃(70～75 ℃)时，溶液中的四种脱氧核苷酸在Taq DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA，称为延伸。 答案　A (长春模拟)下列关于PCR的描述中，正确的是 (　　)。 ①PCR是一种酶促反应　②引物决定了扩增的特异性 ③扩增DNA利用了热变性的原理　④扩增的对象是氨基酸序列 A．①②④ B．②③④ C．①③④ D．①②③ 解析　PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，在高温条件下，把DNA的双链打开，缓慢冷却后，又重新结合，需要耐高温DNA聚合酶，同时，还需要引物，从引物的3′端连接脱氧核苷酸。 答案　D 2． 右图是PCR技术示意图，请回答下列问题。 (1)标准的PCR过程一般分为________、________、________三大步骤。 (2)引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段________。 (3)将双链DNA________，使之变性，从而导致________。 (4)引物延伸需提供________作为原料。 3． 解析　(1)PCR过程一般分高温变性―→低温复性―→中温延伸三大步骤。(2)引物的化学本质为一小段单链DNA或RNA。(3)将DNA加热至90 ℃以上，可导致DNA解旋。(4)引物延伸需提供脱氧核苷酸作为原料以形成DNA单链。 答案　(1)高温变性　低温复性　中温延伸　(2)单链DNA或RNA　(3)加热到94 ℃　双链DNA解旋成两条单链　 (4)四种脱氧核苷酸 课堂小结 课堂互动探究 热点考向示例 随堂达标检测 第二节　DNA片段的扩增——PCR技术 课程标准 尝试PCR技术的基本操作和应用。 课标解读 1．简述PCR技术的原理和用途。 2．简述PCR技术的基本操作步骤。 3．进行DNA片段的PCR扩增。 (1)解旋 在_______的作用下解开DNA双链。 (2)合成引物 在____________的作用下，以_________为模板，合成一段RNA引物。 PCR的原理和过程 1．DNA的复制 解旋酶 RNA聚合酶 DNA单链 (3)合成子链 以_________为起点，在___________的作用下，以______ _________为原料，按照______________原则合成两条新的DNA子链。 (1)PCR的定义 DNA体外扩增技术实际上是在体外模拟____