果蝇的三点测交实验.ppt

果蝇的三点测验 实验目的 掌握三点测交的原理及方法 学习三点测交的数据统计处理及分析方法 了解绘制遗传学图的原理和方法 实验用品 三点测交：用三杂合体和三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在试验中检测到所发生的双交换。如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换，那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积，但实际上观察到的双交换值往往低于预期值，因为每一次发生单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一半，这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。并发率==观察到的双交换频率/两个单交换频率的乘积。 实验步骤 1、选处女蝇 2、接种培养 野生型为母本，三隐性雄蝇为父本， 贴好标签，于25℃培养 3、7d后，释放杂交亲本 3、再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观 察记录F1表型及性别 4、选取3-5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃培养， 其余F1代果蝇处死 5、7d后，处死F1亲本 6、再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d， 观察眼色，翅形及刚毛形态 实验结果 设计表格将F2代各表型个体数填入表中，确定基因间重组发生的情况 计算基因间的重组值及双交换值 根据计算结果画出遗传学图，注意用双交换值对位于两端的基因间距离进行校正 计算并发系数和干涉值 * * 黑腹果蝇品系： 野生型果蝇（+++） 红眼、长翅、直刚毛 三隐性果蝇（wmsn3） 白眼、小翅、焦刚毛 三隐性个体为白眼（w）、小翅（m）、焦刚毛（sn3），这三个基因都位于X染色体上。 恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿 同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体上的基因之间会发生一定频率的交换，使子代中出现一定数量的重组型。重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。而根据基因在染色体上直线排列的原理，基因交换频率的高低与基因间的距离有一定的对应关系。基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，直接将重组值作为基因图距；如果基因间相距较远，两个基因间往往发生两次以上的交换，必须进行校正，来求出基因图距。 实验原理 P ♀三隐性 w m sn3 × + + + 野生型♂ w m sn3 ↓ F1 w m sn3 × w m sn3 + + + ↓ 测交后代：w m sn3 + m sn3 w + sn3 w m + + + + w + + + m + + + sn3 ? ? 本实验所用三隐性个体为白眼（w）、小翅（m）、焦刚毛（sn3）， 这三个基因都位于X染色体上。先用野生型果蝇与三隐性果蝇（白眼、小翅、卷刚毛）杂交，制成三因子杂种，再把雌性杂种与三隐性个体测交，在测交后代中由于基因间的交换可得到８种不同的表型，经过数据处理，一次实验便可测出三个连锁基因在染色体上的距离和顺序，绘制出连锁图。