毕业论文-人间充质干细胞携带dcc基因治疗卵巢癌的实验研究.docVIP

妇产科学专业优秀论文 人间充质干细胞携带DCC基因治疗卵巢癌的实验研究 关键词：卵巢肿瘤 基因疗法 充质干细胞 摘要：目的：研究DCC基因转染对卵巢癌细胞体外、体内的治疗作用及其对化疗药物敏感性的影响。初步探索问充质干细胞作为卵巢癌基因治疗的载体携带DCC基因治疗的可能性及方法。 方法：采用脂质体转染法将含有DCC基因的重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-DCC导入卵巢癌细胞系HO-8910中，经氨基糖甙类抗生素G418筛选，RT-PCR技术以及免疫组化法检测DCC基因mRNA及蛋白表达情况。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长情况及经梯度浓度顺铂及紫杉醇处理后的细胞存活率。电镜观察超微结构改变。将转染DCC基因的HO-8910细胞注入裸鼠皮下，观察移植瘤的生长情况及顺铂、紫杉醇的治疗效果，电镜观察超微结构。将pcDNA3.1(+)-DCC及脂质体混合物注入裸鼠体内，观察对卵巢癌移植瘤形成的预防作用。采用密度梯度离心法自脐带血中分离培养人MSCs，并构建了带有报告基因EGFP的重组质粒pcDNA3.1-(+)-DCC-IRES-EGFP，采用脂质体转染法将pcDNA3.1-(+)-DCC-IRES-EGFP转入MSCs中，荧光显微镜观察绿色荧光，RT-PCR检测DCCmRNA。将携带。DCC基因的MSCs注入裸鼠卵巢癌移植瘤，观察体内DCC基因表达情况。 结