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实验 5 减数分裂的观察 一、实验目的 了解高等植物小孢子母细胞减数分裂的过程,观察减数分裂中染色体的动态变化,学习并掌握植物细胞减数分裂染色体标本的制作方法。 * * 二、实验原理 减数分裂(meiosis)是高等生物个体在形成生殖细胞过程中发生的一种特殊的分裂方式。在这个过程中,DNA复制一次,细胞连续分裂两次,结果形成的生殖细胞染色体减半,称为减数分裂。减数分裂是生物遗传与变异的细胞学基础。 * * 在植物的花粉形成过程中,花药内的一些细胞分化为小孢子母细胞(2n),每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小孢子(n)。在适当的时期采集植物的花药,经固定、染色、压片等操作程序后,就可以在显微镜下看到细胞减数分裂过程中染色体的动态变化。 二、实验原理 * * 三、实验用品 1.器材:解剖器材,盖玻片,培养皿, 吸管。 2.试剂:1N HCl溶液,Carnoy固定液; 改良苯酚品红染液。 3.实验材料:花蕾 * * 取未绽放的花蕾,投入Carnoy固定液中固定1~2小时,也可将材料置于70%的酒精中长期保存。 制片的方法同根尖染色体的制备方法。 预处理 四、实验步骤 * * 压片法制备植物减数分裂装片 (1) 取材 获得处于适当减数分裂期的材料是制片成败的关键因素,而最适的时期又因实验主要目的不同而异。(2) 固定 最常用的固定液是卡诺氏固定液。经过固定处理的材料更易于染色、分色和保存。(3) 涂抹 用镊子直接从固定液或保存液中取出材料(花蕾、花序、幼穗等),用洁净的刀片或镊子压在小孢子囊或花药上向一端轻轻抹去,将花粉母细胞压挤出来,注意勿使花药太过破碎;将挤出花粉母细胞(呈半透明胶状)小范围内涂成薄层。 四、实验步骤 * * (4) 染色 在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液,稍后用镊子把所有可见花药壁残渣清除干净。 (5) 初检与压片 染色后置于低倍显微镜下初步检查,若花粉母细胞正处于分裂期,即可压片。(6) 镜检观察 在低倍镜下寻找适当视野,并正确区分处于减数分裂各个时期的花粉母细胞、二分体、四分体以及花粉粒、花药壁残留组织与细胞。 四、实验步骤 压片法制备植物减数分裂装片 * * 减数分裂前期I 五、实验结果 * * 减数分裂中期I 减数分裂后期I 五、实验结果 * * 减数分裂后期I 减数分裂末期I 五、实验结果 * * 六、实验报告 在取材过程中需要注意的问题有哪些? 减数分裂制片通常可以采用哪些方法? 绘图表示植物细胞减数分裂的各个时期。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
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