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梅毒的实验室检查 胡学军 嘉善中医医院检验科 梅毒的定义 定义:梅毒是一种慢性传染性疾病。是由梅毒螺旋体(苍白螺旋体)引起,患病后病程漫长,早期侵犯生殖器和皮肤, 晚期侵犯全身各器官,并生多种多样的症状和体征,病变几乎能累及全身各个脏器。 病原体为梅毒螺旋体,属于密螺旋体属,苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum) 苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 地方亚种 地方性梅毒 极细亚种 雅司病 密螺旋体属 品他螺旋体 品他病 传播途径 梅毒患者的皮肤、粘膜中含梅毒螺旋体,未患病者在与梅毒患者的性接触中, 皮肤或粘膜若有细微破损则可得病。 获得性梅毒 (后天)早期梅毒病人是传染源,95%是通过不洁性交传染,少数通过接吻, 握手、输血、接触污染的内衣湿毛巾、茶杯、烟斗、哺乳、尿布等传染。 胎儿梅毒(先天 ):孕妇体内螺旋体,一般在妊娠3—4月通过胎盘感染婴儿。 免疫性 特异性抗体 感染2周后产生特异性IgM抗体, 不能通过胎盘 感染4周后出现特异性IgG抗体,可通过胎盘 非特异性抗体 刺激机体产生抗心磷脂抗体/反应素 RPR 和 TRUST等方法可检出:5~7周或硬下疳后2~3周 完全治愈的早期梅毒可再感染 梅毒的实验室检测方法 显微镜检测法: (1) 暗视野显微镜检查 (2) 镀银染色检查 血清学检测法: 非梅毒螺旋体抗原血清试验 (1)VDRL(性病研究实验室试验):需灭活 (2)USR(不加热血清反应素试验) (3)RPR(加速血浆反应素环状卡片试验) (4)TRUST(甲苯胺红不加热血清试验) 梅毒螺旋体抗原血清试验 (1)FTA-ABS (2)TPPA/ TPHA (3)TP-ELISA (4)发光法 (5)胶体金法 暗视野显微镜检查 标本类型:梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液、淋巴结穿刺液 方法:暗视野显微镜下查找梅毒螺旋体。 结果:典型的梅毒螺旋体呈白色发光, 其螺旋较密而均匀。运动方式: ①伸缩其螺旋间距离而移动(主要方式)②蛇行式③旋转式 评价: ①. 简单、可靠。 ②. 早期:硬下疳(梅毒血清学试验仍阴性)。 ③. 阴性不能排出患梅毒的可能性 镀银染色检查 基本原理:梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染色,从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体 结果:棕褐色的梅毒螺旋体 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST): 原理: 抗原以胆固醇晶粒为载体,包被上心磷脂和卵磷脂,构成VDRL(抗类脂)抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到甲基胺红上,当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时,出现凝集,凝集颗粒呈红色。 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST): 特点:敏感度高、特异性低,易出现假阳性 用途 作为筛选 定量检测:观察疗效、复发和再感染 梅毒螺旋体抗体测定(ELISA法) 特点:检测总抗体 (1)用作筛查和确认试验:敏感性、特异性高 (2)不用于观察疗效、复发和再感染:感染梅毒螺旋 体后,体内产生的抗螺旋体抗体持续存在,甚至 终生,即使经过足够的抗梅治疗,其血清反应仍 持续阳性 TPPA(明胶凝集实验) 确证实验/确诊实验 采用梅毒螺旋体天然抗原作为诊断抗原特异性和灵敏度高,检测的是IgM抗体,可以检测到潜伏梅毒,但操作繁琐,费用高 梅毒螺旋体抗体测定(ELISA法)结果的解读 阴性对照OD≤0.1,阳性对照OD>0.8时实验正常,否则实验无效。计算方法:cut-off(co)值=0.12+阴性对照平均OD值s/co值=病人OD值/ cut-off(co)值,s/co值大于或等于1判为阳性,s/co值小于1判为阴性 注s/co值在0.5~2.0之间的灰区样本需复检确认后报告 三种方法联合检测 TRUST ELISA TPPA * * *
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