HPLC高效液相色谱培训--讲义.pptVIP

高效液相色谱 High Performance Liquid Chromatography，HPLC 一、基本原理和特点： 基本原理：溶于流动相中的各组分经过固定相时，各组分与固定相发生相互作用，由于其性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。 特点：分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动化。 二、高效液相色谱仪器 1、流程 2、高效液相色谱仪组成 1、输液系统：高压输液泵（带脱气装置） 2、进样系统：耐高压的六通阀进样装置 3、分离系统：色谱柱 4、检测系统：紫外、二极管阵列、荧光、蒸发光散射等 5、数据记录处理系统 （l）紫外检测器 灵敏度高； 线形范围高； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 波长可选，易于操作； 可用于梯度洗脱。 （2）二极管阵列检测器（DAD） 可实施一个样品的全波长扫描； 可同时给出紫外光谱和色谱图，便于组分定性和定量； 可进行峰的纯度检测； 可提供各种类型的色谱图（单波长色谱图、任意两个波长的吸收比色谱图、最大吸收波长色谱图以及总体吸收色谱图）。 （3）示差折光率检测器 除紫外检测器之外应用最多的检测器； 可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度呈正比； 几乎所有物