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- 2017-04-10 发布于湖北
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第五章 体外培养的基本技术
一、培养操作基本要领和要
(一)无菌操作
防止污染是决定培养成败的首要条件。
(二)培养前准备
?操作野消毒
?洗手和着装
?火焰消毒
(三)培养操作:动作要准确敏捷,东西摆放在
正确位置,防止污染。
二、基本培养操作技术
(一)取材:
? 含有维持液或BSS的无菌标本瓶 。
? 除去组织表面上的血块和血迹,尤其开
放性器官来源的组织。
? 超净工作台内进行操作。
? 1cm3组织块。
? 取材后立即培养,否则4℃保存,以不超
过6h 为宜。
(二)组织的分离
原则:
获取单细胞
同时尽可能不损伤细胞
常用方法
机械法
化学法
1.离心分离法:适用于血液、羊水、胸腹水细
胞的培养。注意:
? 低速离心,通常500~1000 rpm/min,
5~10min. 悬液量大时,离心时间
适当延长。
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