革兰氏阴性菌群体感应系统研究进展指导.docVIP

革兰氏阴性菌群体感应系统研究进展 摘要：群体感应（quorum sensing，QS），又称为自体诱导(autoinduction)，是一种调节细菌群居行为及特殊基因表达的有效机制，描述细菌之间保持细胞密度变化的化学信号，是一种细菌与细菌间的通讯系统。通常将群体感应系统分为革兰氏革兰氏阴性菌的LuxI/LuxR型QS系统、革兰氏阳性菌的寡肽类群体感应系统和感知种间信号的群体感应系统。植物病原细菌中常见的致病菌是革兰氏阴性菌，所以对革兰氏阴性菌群体感应系统的研究很有必要。 关键词：群体感应 ；革兰氏阴性； LuxI/LuxR 群体感应（quorum sensing，QS），又称为自体诱导(autoinduction)，是一种调节细菌群居行为及特殊基因表达的有效机制，描述细菌之间保持细胞密度变化的化学信号，是一种细菌与细菌间的通讯系统。这种通讯系统依赖于一种小的可扩散的信号分子，这种小的信号分子称为自体诱导素(autonicers,AI)，由细菌产生并向细胞外扩散，在周围环境中积累。随着种群密度的增加，环境中积累的AI信号分子的浓度也成比例地增高，当达到一定阈值水平时细菌通过细胞内受体对这些信号分子进行检测，进而子与一种转录激活因子结合，诱导有关基因的协调表达[1]。自体诱导物与转录活性蛋白相互作用，启动基因表达，调节相关群落活动和独立过程。目前已经在细菌中发现了129个与群体感应相关的基因，包括群体感应调节基因和信号合成基因。 通常将群体感应系统分为革兰氏革兰氏阴性菌的LuxI/LuxR型QS系统、革兰氏阳性菌的寡肽类群体感应系统和感知种间信号的群体感应系统。植物病原细菌中常见的致病菌是革兰氏阴性菌，所以对革兰氏阴性菌群体感应系统的研究很有必要。 在革兰氏阴性细菌中存在自身常见的LuxI/LuxR型QS系统和感知种间信号的AI-2信号系统。 1 革兰氏阴性菌的LuxI/LuxR型QS系统 革兰氏阴性菌中感知种内数量的QS系统一般利用酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserinelactones,简称 acyl-HSL或AHLs，这类分子一般称为AI-1。LuxI蛋白是白体诱导物合成酶，能够合成此类信号分子, LuxR蛋白是细胞质内白体诱导物感受因子，同时也是一种DNA结合转录激活元件，AHLs扩散到细胞外后[2]，随着细胞密度的增加而积累，当这种信号密度积累到临界密度时就与LuxR结合，结合后的复合物能激活荧光素酶基因转录。 上世纪70年代，人们在对海洋生物费氏弧菌（Vibrio fischer）发光机制研究中发现细菌细胞间存在信息交流，此后进一步证明细菌细胞间的信息交流普遍存在于各种细菌中[3],细菌可以通过分泌特定的信号分子以一种群体密度依赖的方式协调自身行动。目前对V.fischer 的生物发光机制[4]已经研究的非常详细，并成为研究革兰氏阴性菌群体感应的模式系统。目前已在近70个种的革兰氏阴性菌中发现了这类LuxI/LuxR型QS系统[5]，这些信号系统的信号分子与费氏弧菌群体感应系统信号分子相似，其系统作用模式如下。 如图1所示,费氏弧菌中的荧光素酶有LuxCDABE基因编码,LuxI及LuxR蛋白构成群体感应的调控蛋白,其中LuxI为群体感应信号分子合成酶,能合成一种酰基高丝氨酸内酯类化合物[N-(3-氧代-己酰)-高丝氨酸内酯][6,7]。LuxR 与群体感应信号分子结合后被激活，对LuxCDABE 基因表达起正调节作用。在低细胞密度时，细胞通过LuxI基因产生低浓度的群体感应信号分子，LuxCDABE 基因在LuxI 基因下游，此时只能在低水平上进行转录。 群体感应信号分子能够自由通过细胞膜，从而使胞内外群体感应信号分子浓度相同。随着细胞生长，细胞密度增加，群体感应信号分子积累到极限浓度（1~10μg/mL）时，就能和细胞质中的LuxR蛋白充分结合，结合群体感应信号分子后，LuxR蛋白的DNA结合区域暴露，此时LuxR蛋白能与LuxCDABE 基因的启动子结合，从而激活该基因的转录[8]。群体感应信号分子与LuxR蛋白结合导致群体感应信号分子合成酶及荧光释放强度呈指数增加。 细菌中还必须存在一种组织LuxI/LuxR型群体感应过早作用的机制，因为信号分子和感受因子都是在细胞质中合成并相互作用的。在植物病原细菌Agrobacterium tumefaciens 中，LuxR的类似物TraR,在没有AHL存在的情况下，半衰期为几分钟，而在AHL存在的情况下，半衰期延长至30min[9]。TraR的结构决定其与AHL的结合需要新生多肽折叠[10]。用放射性同位素标记TraR证明，当TraR与AHL分子结合后才能更稳定[11]。 acyl-HSL信号是quorum-sensing调控系统的重要组分，acy