一种新生SD大鼠皮质源性神经元的培养方法.docVIP

一种新生SD大鼠皮质源性神经元的培养方法 王东艳1，杨金伟2，程敬茹3，马 微1，李兴统1，郭建辉2，李力燕1(1昆明医科大学神经科学研究所，云南省昆明市 650500；2云南省第一人民医院普外二科，云南省昆明市 650032；3昆明理工大学医学院，云南省昆明市 650500) 引用本文：王东艳，杨金伟，程敬茹，马微，李兴统，郭建辉，李力燕. 一种新生SD大鼠皮质源性神经元的培养方法[J].中国组织工程研究，2016，20(51):7672-7677. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.011 ORCID: 0000-0002-8961-5807(王东艳) 文章快速阅读： 文题释义： 大脑皮质：是大脑的表层，由灰质构成，其厚度为1-4 mm，其下方大部分由白质构成。大脑皮质的神经元都是多极神经元，按其细胞的形态分为锥体细胞、颗粒细胞和梭形细胞三大类。大脑皮质是调节躯体运动或者说控制躯体运动的最高级中枢。 神经元：又称神经细胞，是构成神经系统结构和功能的基本单位。具有长突起，由细胞体和细胞突起构成。细胞体位于脑、脊髓和神经节中，细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。神经元的核大而圆，位于细胞中央，染色质少，核仁明显。常见的形态为星形、锥体形、梨形和圆球形状等。 摘要 背景：神经元的体外原代培养在研究神经系统的发育、再生、信号转导机制、神经药理学以及基因表达方面具有极其重要的地位。 目的：建立一种操作更加简单且能够得到较高纯度新生SD大鼠皮质神经元原代培养的方法。 方法：取1 d新生SD大鼠皮质。传统方法实验组：取整个皮质；改良方法实验组：取SD大鼠表面2.0-3.0 mm处皮质。木瓜蛋白酶消化后离心，制备成单细胞悬液，以1×105/孔的浓2014C020Y)；2014年省级临床重点专科建设项目-普外科(云南省第一人民医院) A culture method for cortical neurons derived from neonatal Sprague-Dawley rats Wang Dong-yan1, Yang Jin-wei2, Cheng Jing-ru3, Ma Wei1, Li Xing-tong1, Guo Jian-hui2, Li Li-yan1 (1Institute for Neuroscience, Kunming Medical University, Kunming 650500, Yunnan Province, China; 2Second Department of General Surgery, the First People’s Hospital of Yunnan Province, Kunming 650032, Yunnan Province, China; 3Medical Faculty of Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, Yunnan Province, China) Abstract BACKGROUND: Primary culture in vitro of neurons plays an important role in the development, regeneration, signal transduction mechanisms, neuropharmacology and gene expressions of the nervous system. OBJECTIVE: To establish a simple method for primary culture of high-purity cortical neurons in neonatal Sprague-Dawley rats. METHODS: Cortical tissues were acquired from neonatal Sprague-Dawley rats born 1 day. In traditional experimental group, the whole cortex was removed; in improved experimental group, the cortical tissues, 2-3 mm thick on the brain surface were removed. Single cell suspensions were prepared after papain digestion and c