细胞生物学及其实验试题（副本）.docVIP

简答题： 张建同学再观察变形虫临时装片时，发现视野中有一较大的变形虫，但在图像上有一小片污物，影响对变形虫的观察。 （1）在不调换目镜和物镜的情况下，他应如何半段污物在何处？写出操作步骤 （2）如果确认污物在装片内部，在既不允许重新制作装片又不能掰开盖玻片的情况下，如何清除污物或使污物与变形虫分开？ 答：（1）首先先转动目镜，若污物跟随者目镜转动，说明污物在目镜上；若转动物镜，在视野里看不到污物表明污物在物镜上；移动装片，若视野里的污物有移动表明污物在装片上面。 （2）在临时装片的盖玻片的一端滴加几滴清水，在另一端用吸水纸将水吸出，同时也可将装片内的污物一块吸出。 比较放大率与分辨率的含义 答：二者都是衡量显微镜性能的指标。通常放大率是指显微镜所成像的大小与样本实际大小的比率；而分辨率是指分辨或区分出被检物体细微结构的最小间隔，即两个点间的最小距离。放大率对分辨率有影响，但分辨率不仅仅取决于放大率。 为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜？ 答：电子显微镜用电子束代替了光束，大大提高了分辨率，电子显微镜相对光学显微镜是个飞跃。但是电子显微镜样品的制备更加复杂，镜筒需要真空，成本更高，只能观察“死的样品”，不能观察活细胞。光学显微镜技术性能要求不高，使用容易，可以观察活细胞，观察视野范围广，可在组织内观察细胞间的联系，而且一些新发展起来的额光学显微镜能够观察特殊的细胞或细胞结构组分。因此，电子显微镜不恩呢该完全代替光学显微镜。 在做《用高倍镜观察线粒体、叶绿体以及细胞质流动实验》时，请回答： （1）为什么不用植物细胞来观察线粒体？ （2）如果发现线粒体染色不足，该如何补色？ （3）观察细胞质流动实验的首选材料有哪些？ （4）为什么要用叶绿体的运动作为标记，观察细胞质流动？ （5）在做观察细胞质流动实验时，如果发现细胞质不流动，或者流动很慢，应立即采取什么措施加速其细胞质流动？ 答：（1）植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色 （2）在盖玻片一侧滴加健那绿染液，另一侧用吸水纸将染液吸至盖玻片中，吸出盖玻片 （3）黑藻、藓类、植物花丝的雄蕊 （4）因为植物细胞的细胞质中叶绿体较多，呈绿色、扁平的椭球形或球形，较为明显，以叶绿体的运动作为标记，容易观察细胞质的流动，如果没有标志物，细胞质的流动难以观察 （5）方法有三种：一是进行光照，即在阳光或灯光下放置15~20min；二是提高放置黑藻的水温，课加入热水将水温调至25℃左右；三是切伤一小部分叶片 显微镜视野中的污染物，如何半段其实在目镜、物镜还是在玻片上？若污染物在物镜上，该怎么办 答：移动载物台，动则在玻片上，转动目镜镜头，动则在目镜上，否则在物镜上 若镜头被污染，可用牙签滚卷擦镜纸沾少量乙醚乙醇液（乙醚：无水乙醇=1:1）擦拭镜头上的灰尘、油脂、染料、粘合剂等混合污垢。为保护镜头本质，尽量不适用强有机溶剂（如二甲苯等） 荧光显微镜和普通显微镜有什么主要区别？ 答：（1）照明方式通常为落散式，即光源通过物镜透射于样品上 （2）光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜 （3）有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人眼 其计算公式是σ=λ/NA 式中σ为最小分辨距离；λ为光线的波长；NA为物镜的数值孔径。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。要提高分辨率，即减小σ值，可采取以下措施: （1） 降低波长λ值，使用短波长光源。（2）增大介质n值以提高NA值（NA=nsinu/2）。（3） 增大孔径角u值以提高NA值。（4） 增加明暗反差。 比较Giemsa染色和Janas Green B染色（注意染色操作和结果的区别） 答：（1）Giemsa染色前，细胞须固定（染死细胞），主要染的是核、细胞质 （2）Janas Green B染色染的是活细胞（染色前不用固定），主要染的是线粒体 综合题（论述题） 简述Feulgen反应的原理及做好本实验的关键 答：（1）DNA经酸水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，使细胞内含有DNA的部分呈紫红色阳性反应，从而显示出DNA的分布 紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团，所以具有颜色，该反应对DNA具有专一性 （2）Feulgen反应成功的关键在于Schiff试剂的质量。Schiff试剂只能选用注明“DNA染色反应用”的碱性品红才行 简述线粒体詹纳斯绿B活体染色原理 答：线粒体是细胞内一种重要的细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动