家畜寄生虫学实习大纲.docVIP

实习报告 实习要求： 1．确定寄生虫的种类、感染率及感染强度．掌握寄生虫的粪便学检查方法，虫卵计数。 ．掌握寄生虫标本的保存方法及制作装片的方法。 ．熟悉球虫药效力的测定方法、步骤等试验及评价程序指标。 时间 地点 内容 201年5月日 逸夫楼安排实习内容 2012年5月日 2012年月日 2012年月 日 2012年月 日 2012年月 日 2012年月 日 逸夫楼 写实习报告。 实验一 羊体的蠕虫学剖检和虫体采集 一．实验材料 1．实验动物：山羊1只 2．实验器材：塑料水桶个；塑料脸盆3个；不锈钢剪刀1把；手术剪刀3把；大镊子3把；小镊子4把；解剖刀柄 1把；挑虫针根；500 ml广口瓶2个；100ml烧杯8个；麦氏计数器 2片；6cm培养皿6套；计数器1个。．实验内容 （一）体外寄生虫的采集——羊的体表 1．毛虱、颚虱、虱蝇、蠕形蚤等 将采集到的虫体放于瓶内，饥饿1-2天，加入保存液保存，虱卵应连毛取下放于瓶内或保存液内保存。 2．疥螨 用小刀刮皮肤患部的干硬痂皮，再刮取病部与健康皮肤交界处的皮屑，至微出血为止，将此皮屑放在空瓶内或保存液(甘油酒精液)内保存。 3．蠕形螨 在毛囊内，皮下形成米粒大小的结节，可将结节切开取其内容物涂片镜检，或者连皮肤切下，放在10%福尔马林或70%酒精内固定保存。 （二）体内寄生虫的采集 1、首先检查食道的正反面,是否有美丽筒线虫及住肉孢子虫, 如果发现寄生虫可连同被寄生的组织一起剪下,保存于巴氏液中。 2、肺脏：首先剪开支气管及大支气管,检查是否有大型肺线虫(网尾线虫)，然后检查小支气管或细致地撕开肺的边缘部分看是否有小型肺线虫(原圆线虫、缪勒线虫等)。将采集检查吸附在粘膜到的虫体放于保存液中,肺脏表面还应注意观察是否有细粒棘球蚴的寄生。如有则应连同肺组织一起剪下放于保存液中。 3、肝脏：先检查是否有细粒棘球蚴,然后检查胆囊,检查内部,并切开胆管,检查有否肝片吸虫或矛形双腔吸虫的寄生,然后将肝撕成小块用清水反复冲洗至上部液体清亮为止,倒去上清液,将沉渣倒入盘内检查有无虫体。 4、胰脏和检查肝脏的方法相同,检查有否胰阔盘吸虫。 5、肠系膜：检查肠系膜血管是否有血吸虫,并将肠系膜淋巴结切开检查有无舌形虫的幼虫,注意肠系膜上是否有细颈囊尾蚴的寄生,如有,可取下放于70%酒精或巴氏液中。 6、胃：将胃分离,首先切开第一胃(瘤胃)倒出内容物,检查吸附在胃粘膜上的前后盘吸虫。 然后将第四胃(皱胃)的内容物倒入瓷盆内,将其翻过来用生理盐水充分洗净,再用生理盐水反复冲洗,最后将沉渣倒入大培养皿内检查是否有捻转血矛线虫、奥斯特线虫、马歇尔线虫以及古柏线虫等,如发现虫体,可用解剖针挑出放于保存液中。 7、小肠：沿肠系膜对侧长轴剪开肠壁,先从十二指肠开始,边剪开边检查,并把肠内容物接到搪瓷盘内, 如有寄生虫,用镊子夹到1%盐水内。 在羊小肠内可以发现：羊斯克里亚宾吸虫、莫尼斯绦虫、无卵黄腺绦虫、曲子宫绦虫、仰口线虫、类圆线虫、毛细线虫、古柏线虫、细颈线虫、奥斯特线虫、毛圆线虫等。 当发现有绦虫时,应轻轻的用剪刀尖紧贴肠壁,避免剪断虫体。其次应留心前端细小的头节不可拉断或失去,要小心的刮下完整头节,如果有头节牢固吸着宿主肠壁则须连同肠壁组织一起取下,一般不超过5分钟。(时间过久水分渗入虫体内,就破坏了内部组织器官,影响鉴定)。洗净的虫体放于70%酒精或巴氏液固定保存。 8、大肠：将大肠的内容物倒入桶中,翻转大肠,用水冲净,再将内容物反复冲洗,然后将沉渣倒入玻璃盘内检查,在大肠中主要有毛首线虫、夏伯特线虫、食道口线虫等寄生,另外还应注意检查肠壁上有无粟粒大至豌豆大的结节(食道口线虫引起的结节)。将采集到的虫体组织浸于70%酒精或巴氏液中保存。 9、直肠：收集直肠中的粪便入一次性手套中，实验室放4℃冰箱保存备用。以检查粪便中的虫卵种类和每克粪便中虫卵数量。并将之计入表格中。 （三）寄生虫标本的保存 线虫通常是用巴尔巴卡罗氏液(简称巴氏液)固定保存,配方如下：福尔马林液30毫升,食盐7.5克,水1000毫升,吸虫、绦虫和棘头虫则常用70%酒精固定保存。 鉴定：小型线虫一般比较弯曲,可把虫体逐条放入40-50℃热生理盐水内,使虫体伸直,便于鉴定,然后把虫体移入固定液内。 在固定保存吸虫和绦虫之前,应先将虫体浸入常水中(或冰箱中12小时)，使之死亡。这样可使虫体的组织松弛。需要制片时,可将虫体平放于载玻片上,加盖一张载玻片,并稍加压力把虫体压平至适当薄度后(依虫体的大小薄厚而定),放在培养皿内,加入10%福尔马林液固定之。一般固定数小时,较大型的虫体要在一天以上。固定后,翻开盖在上面的玻璃片把虫体标本慢慢取下,置于