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区分野生型和突变体果蝇实验 一、【目的】 1、熟悉野生型和突变体果蝇的各种性状特征。 2、能够区分野生型和突变体果蝇。 3、区分几种常见的突变性状；白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。 二、【原理】 1、果蝇的各种类型及特点： 野生型 灰身 红眼 直刚毛 长翅 圆眼残翅 灰身 红眼 直刚毛 残翅 圆眼三隐形 灰身 白眼 卷刚毛 小翅 圆眼黑檀体 黑身 红眼 直刚毛 长翅 圆眼 2、野生型果蝇为红眼、灰体、长翅、直刚毛。”+”突变体与野生型有明显差别： 白眼其他形状与野生一样。”W”乌身又叫黑檀体，”e”残翅翅膀显著退化，部分残存，不能飞“vg” 野生型 突变体 三、【材料】 黑腹果蝇 四、【方法】 1、培养基的配制 果蝇培养基的配制 配方水／ml琼脂／g蔗糖／g玉米粉／g丙酸／ml酵母粉／g① ②80 1001.5 113 1010 105 0.55 0.5配方①可用于培养杂交果蝇，因培养基较干稠，可避免黏着果蝇．配方②可用于原种保存，因培养基较稀，可延长培养时间．两种培养基也可都用苯甲酸而不用丙酸． 2、果蝇的饲养 25度是其最适宜的生长温度。 3、果蝇的麻醉 果蝇麻醉方法 1．取下培养瓶塞，将培养瓶与麻醉瓶紧密对接； 2．左手握紧两瓶接口处，倒转使培养瓶向上； 3．右手轻拍培养瓶将果蝇震落到麻醉瓶中； 4．分开两瓶，将瓶盖各自盖好； 5．将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底，迅速拔出塞子，滴上几滴乙醚，重新塞上麻醉瓶； 6．一段时间后，观察果蝇，不再爬动，并在瓶壁上站不稳，麻醉完成。注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。 7．将麻醉好的果蝇倒出，在一张滤纸上，观察果蝇的性状。 8．将需要的果蝇用毛笔转移到一个新的培养瓶中，注意先将培养瓶平放，待果蝇苏醒后再将培养瓶直立起来，以防果蝇被新配制的略带粘稠的培养基粘住。 4、果蝇的转移 5、果蝇的杂交 （1）.选处女蝇 选白眼焦刚毛小翅处女蝇8只，同时选野生型处女蝇8只。方??:将野生型和白眼焦刚毛小翅果蝇培养瓶内的成蝇全部赶去，12小时内将重新孵化出的雌雄果蝇分开，即可得所需处女蝇和雄蝇。 (2).杂交 将白眼焦刚毛小翅处女蝇麻醉，并挑取野生型♂蝇8只麻醉后放入培养瓶，此杂交组合可用作伴性遗传和基因定位的观察统计。将野生型处女蝇8只麻醉，同时将同样数量的白眼焦刚毛小翅雄蝇麻醉，放入培养瓶，此组合用于分离定律和伴性遗传实验的反交。贴好标签。注明杂交组合和日期，学生姓名。 3. 25℃条件下培养 7～8天后，赶去亲本蝇。 (3).观察F1 11～13天后，F1代羽化，用放大镜对正交组合的F1进行观察，看F1雌蝇是否为野生型，雄蝇是否全为三隐性，若不是，表明处女蝇是非处女蝇，实验失败。 (4).F1正交 选8对F1雌雄蝇麻醉，转入新的培养瓶，进行正交，贴好标签。 （5）.放飞F1 8天后赶去F1。 (6）.观察F2 12天后，F2羽化，将其麻醉后于白瓷板上用放大镜观察，或用解剖镜、显微镜观察各种表型的果蝇并统计数目，每隔2天观察一次，连续4次。统计后的果蝇倒入死蝇盛留器中。 6、取亲本（处女蝇亲本） 7、F1 带自交 8、再取亲本（F1亲本） 9、根据突变性状记录结果 一些常见的突变性状 野生型：灰身、长翅（长度约为腹部长度的两倍）、红眼、直刚毛（头胸部以及复眼的周围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛）； 突变体1：黑檀体、红眼、残翅、直刚毛 突变体2：白眼、灰身、长翅、直刚毛 突变体3：小翅（长度与身体相等）、白眼、焦刚毛 五、【讨论与结论】 六、【作业和文献】 作业 1．如何鉴别果蝇的雌雄？ 2、如何区分野生型和突变体的要点？