高效毛细管电泳法分离检测人体血浆中盐酸伪麻黄碱和磷酸可.PDFVIP

书第 !! 卷第 期 #$%% 年 %# 月 湖北大学学报!自然科学版 ()*+,-.(/012*130)415 6 ! 7+5()+,8910*90 :,;!! ! 7; ! 09; # #$%% ! 收稿日期! #$%% $ $= 基金项目!惠州学院科研项目! # %$ $ $### 资助 作者简介!李险峰! %?=$ #男#硕士#实验师# @AB+1, % C1*D?#E ! %F!;9B 文章编号! %$$$ #!GE ! #$%% $ $E#E $! 高效毛细管电泳法分离检测人体血浆中 盐酸伪麻黄碱和磷酸可待因 李险峰%!朱平川# ! %; 惠州学院化学工程系#广东 惠州 E%F$$G #; 广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室#广西 南宁 E!$$$E 摘要 ! 建立毛细管区带电泳同时测定人体血浆中盐酸伪麻黄碱和磷酸可待因含量的方法 ; 在 GE BH;I F$9B 未涂层石英毛细管中#以 !$BB, JK)14A., 为电泳缓冲溶液#分离电压为 ##L: 时#两种被测组分在 E B1* 内达到基线分离 ; 盐酸伪麻黄碱和磷酸可待因的检出限分别为 $;E$ ( $;!$ M BJ #样品加标回收率在 ==N # ?EN 之间#相对标准偏差! # 均小于 EN; 该方法简便(快速(准确#并成功用于人体血浆样品的分析 ; !! 关键词 ! 毛细管电泳盐酸伪麻黄碱磷酸可待因人体血浆 !! 中图分类号 ! OFEG;= !!!!! 文献标志码 ! P !! 盐酸伪麻黄碱是中草药麻黄中提取的胺类生物碱#具有松弛平滑肌#兴奋中枢神经#发汗解热等作 用)%*#中枢神经兴奋作用远较肾上腺素强 ; 磷酸可待因也是药物中常见的生物碱#研究表明#具有多种生理 活性和药理疗效)#*#如镇静(镇痛(镇咳及抑制呼吸等 ; 但是这两种生物碱都具有一定的毒性和麻醉性 ; 近年来#吸毒和药物滥用对人们的生活和社会安定构成了极大威胁#因此发展准确(灵敏(简便的检测 血浆等体液中毒品及麻醉类物质的分析方法具有重要意义 ; 上述两种常见生物碱检测方法已有报道#如高 效液相色谱法)!*及毛细管电泳法)*#毛细管电泳 A 电致化学发光法)E*以及液相色谱 A 质谱法)%*等 ; 其中毛细 管电泳! @ 由于具有分离效率高(速度快及样品消耗少等优点而被广泛应用于尿样(血清及单细胞等生物 样品的分离分析)FA=* ; 文中提出了一种毛细管电泳同时分离检测盐酸伪麻黄碱(磷酸可待因的新方法#对电 泳分离条件的影响进行系统优化#并将该方法成功应用于人血浆样中此两种物质含量的分析 ; ! ! 实验部分 !! ! 仪器与试剂 ! 美国 Q09LB+* 公司 R P@KS ST 毛细管电泳系统#二极管阵列检测器工作 站% !#U+)+5KS #未涂层弹性石英毛细管! GE BH;IF$9B #有效长度 E$9B !河北永年锐沣色谱器 件有限公司 KV0)BO)1*G#$P 型酸度计离子计!美国 SHJJHROW@ 超纯水系统!美国 8+)5)1(4S@#%E8 电子天平!德国 @ XX 0*D)-0*5)1-( M 0E=%$W 台式高速冷冻离心机 UT##$$: 型数控超声波清洗器!昆山市超声仪器有限公司三!羟甲基氨基甲烷!生化试剂 QW 国药集团化学试 剂有限公司其他试剂均为分析纯#所用水为超纯水对照品盐酸伪麻黄碱(磷酸可待因购自中国药品 生物制品检定所 ; !# ! 溶液配制 ! 标准溶液的配制%准确称取盐酸麻黄碱(磷酸可待因对照品各 %$;$B M #置于 %$BJ 量 瓶中#用水溶解并定容#配成 %;$$B M BJ 的对照品储备液#密封于 Y 下冰箱中保存 ; !$ ! 血浆的预处理 ! 抽取健康青年志愿者血液 !BJ #加肝素抗凝#于 !E$$) B1* 离心 %$B1* #上层清 液即为血浆 ; 取空白血浆和加标血浆 #$$ ! J 于试管中#加入 $;%B, J7+O.E$ ! J #乙酸乙酯 #BJ # E#F ! 湖北大学学报!自然科学版 第 !! 卷 涡旋振荡 EB1* #于 %#$$$) B1* 离心 %$B1* #取出乙酸乙酯层于试管中 ; 此过程重复 ! 次#所得乙酸乙 酯溶液合并在一起#于 =$Y 水浴中氮气吹干#然后用 #$$ ! J 甲醇冲洗试管壁收集样品后蒸干#残余物 用 #$$ ! J 水溶解 ; !% ! 电泳分离条件 ! 以 !$BB, JK)14A., ! X .Z=;$ 为电泳介质#未涂层弹性石英毛细管! GE ! BH; IF$9B 为分离通道#压力进样! $;E X 41IF409 #分离电压为 ##L: #分离温度为 #EY #检测波长为 #%*B; 实验前缓冲溶液用 $;E !