临床微生物检测仪器教学指导.docVIP

第十章 临床微生物检测仪器 首 页 基本要求 重点难点 讲授学时 内容提要 1．基本要求 1.1了 解 (1) 微生物自动化检测系统的常见故障及维护 (2) 微生物自动化检测系统的进展 1.2 熟 悉 (1) 微生物自动化检测鉴定系统的分类 (2) 自动血培养系统的工作原理 (3) 自动血培养系统的性能特点 (4) 微生物自动鉴定及药敏分析系统的性能特点 (5) 常见的自动微生物鉴定和药敏试验分析系统 1.3 掌 握 (1) 第三代血培养系统的检测原理及分类 (2) BacT/Alert系统的检测原理 (3) Bactec9000系列的检测原理 (4) 自动血培养系统的基本结构与功能 (5) 微生物自动鉴定系统的工作原理 (6) 微生物自动药敏分析系统的工作原理 (7) 微生物自动鉴定及药敏分析系统基本结构与功能 2．重点难点 2.1重 点 (1) 自动血培养系统的基本结构与功能 (2) 微生物自动鉴定及药敏分析系统基本结构与功能 2.2 难点 (1) 第三代血培养系统的检测原理及分类 (2) 微生物自动鉴定系统的工作原理 (3) 微生物自动药敏分析系统的工作原理 3．讲授学时 建议6学时~8学时 4．内容提要 4.1自动血培养系统 4.1.1 自动血培养系统的工作原理 自动血培养系统主要由培养系统和检测系统组成。培养系统包括培养基、恒温装置和震荡培养装置。具有培养基营养丰富，检测灵敏度高，检出的时间短，检出病原菌的种类多，抗干扰能力强、污染明显减少等特点。检测系统由计算机控制，对血培养实施连续、无损伤瓶外监测。其工作原理主要是通过自动监测培养基（液）中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化，定性地检测微生物的存在。 根据检测原理的不同分三类 （1）以检测培养基导电性和电压为基础的血培养系统 血培养基中因含有不同电解质而具有一定导电性。微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团（例如在液体培养基内CO2转变成CO3－），通过电极检测培养基的导电性或电压可判断有无微生物生长。 （2）应用测压原理的血培养系统 许多细菌生长过程中，常伴有吸收或产生气体现象，如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉汤中生长时，由于消耗培养瓶中的氧气，故首先表现为吸收气体。而厌氧菌生长时最初均无吸收气体现象，仅表现为产生气体（主要为CO2），因此可利用培养瓶内压力的改变检测微生物的生长情况。 （3）采用光电原理监测的血培养系统 是目前国内外应用最广泛的自动血培养系统。其工作原理是微生物在代谢过程中必然会产生终代谢产物CO2，引起培养基pH值及氧化还原电位改变。利用光电比色检测血培养瓶中某些代谢产物量的改变，可判断有无微生物生长。 根据检测手段的不同，这类自动血培养系统又可分成四类: BioArgos系统 该系统利用红外分光计检测CO2产生； ② BacT/Alert系统 该系统工作原理见图10-1； ③ Bactec9000系列 该系统工作原理见图10-2； ④ Vital系统 该系统采用同源荧光技术来监测微生物的生长。 图10-1 BacT/Alert系统检测原理示意图 图10-2 BACTEC系统检测原理示意图 4.1.2 自动血培养系统的基本结构与功能 （1）BacT/Alert自动血培养系统 ① 培养瓶 为一次性无菌培养瓶，瓶内为负压，便于标本采集时依靠负压作用将血液直接引人培养瓶。每个培养瓶底部都包含一个检测CO2的传感器，通过检测CO2变化作为微生物生长状况的指示器。BacT/Alert自动血培养系统配有专用的需氧培养瓶、厌氧培养瓶、小儿培养瓶和分枝杆菌培养瓶； ② 培养仪 设有恒温装置、振荡培养装置及监测装置。 组成主要包括：主电源开关；显示屏（显示培养瓶和系统信息，包括一个触摸屏便于操作者输入选择和数据）；条形码阅读器（用于装入或卸去培养瓶时扫描条形码确认培养瓶）；键盘（提供另一种输入方式，作为触摸屏或条形码阅读器输入失败时使用）；压缩驱动器（允许将系统资料制成压缩资料磁盘；内部温度监测器：监测培养仪内部温度，预设温度为35℃～37℃）；孵育箱（每个孵育箱由标有A、B、C和D的抽屉组成,每个抽屉拥有3个架子，可容纳60个培养瓶）；瓶位（装载并监测BacT/Alert培养瓶）；指示灯（主灯：灯亮时指示培养仪与微机不交流信息，它只在有限的功能方式中运转；抽屉黄色指示灯：抽屉打开时灯亮，关上抽屉指示灯灭，若抽屉打开时间过长或出现错误状况黄色指示灯将会闪烁；抽屉绿色指示灯：当选择了与抽屉或单元有关的操作，绿色指示灯亮，若抽屉打开时间过长，绿色指