第五章 微生物遺传变异与菌种选育.pptVIP

第五章 微生物遺传变异与菌种选育.ppt

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第五章 微生物遺传变异与菌种选育

第五章 微生物遗传 变异与菌种选育 西昌学院 轻化工程工学院 遗传:具有一定遗传型的个体在一定的培养条件下生长时,子代培养物会表现出与亲代培养物相同的特征,这就是遗传现象。 变异:当遗传型发生改变,也就是说当生物体内的遗传物质发生结构上的变化时,生物体就表现出变异现象。 第一节 遗传变异的物质基础 1.证明遗传物质的三个经典实验 转化实验---遗传物质是DNA; 噬菌体感染实验---证明DNA是遗传物质,且其中含有合成蛋白质的遗传信息; 植物病毒重建实验---遗传物质是RNA; 2.DNA的结构与复制 第二节 微生物的基因突变 广义的突变 染色体畸变 基因突变(狭义突变) 基因突变:由于DNA链中一对或少数几对碱基发生改变,而导致核苷酸序列突然发生稳定的、可遗传的变化。 1.突变类型 野生型菌株:具有天然的、非突变性状的微生物。 突变型菌株:发生了突变的微生物。 1.1按突变所带来的表型改变 形态突变型(如细菌的鞭毛、芽孢或荚膜的有无) 致死突变型(合成关键性酶的基因发生突变,表现出致死突变) 条件致死突变(如温度敏感型) 生化突变营养缺陷型(缺乏合成必须营养物质的突变型) 抗性突变型(对某种外界因素抗性提高) 1.2按突变的条件和原因 自发诱变 诱发突变 2.突变的特点 不对应性 自发性 稀有性 独立性 诱变性 稳定性 可逆性 3.基因突变的机理与菌种的选育 碱基置换:由于某种化学诱变剂的作用,使DNA分子中一对碱基被另一对碱基所取代。 移码突变:指诱变剂使 DNA 分子中的一个或少数几个核苷酸的增添(插入)或缺失,从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。 碱基置换 a.转换:DNA链中原有的一个嘧啶被另一个嘧啶所置换,或一个嘌呤被另一个嘌呤所置换; b.颠换: DNA链中原有的一个嘧啶被一个嘌呤所置换,或一个嘌呤被一个嘧啶所置换; 正常 DNA 链上的三联密码子 第三个密码子中增添一个碱基后的三联密码子 在第二个密码子上缺失一个碱基 A 后引起的变化 移码突变 3.1 诱发突变的机理 诱变剂:能显著提高突变的几率的物理或化学因子称为诱变剂。 诱变剂的种类很多,作用的方式也多种多样,但其最终都通过改变遗传物质的结构而导致突变的发生。诱变剂作用于微生物细胞后可产生不同的诱变效应,有些诱变剂能产生多种诱变效应。 3.2.1 辐射类诱变 很多波长较短地射线,如紫外线、x射线、γ射线以及快中子等都有强烈地诱变作用,其中最有效地是波长为260nm左右地紫外线。 紫外线作用于DNA引起结构的变化: DNA链的断链 DNA分子内和分子间产生交联作用 核酸和蛋白质产生交联作用 形成嘧啶水合物和嘧啶二聚体(链内或链间) 紫外线的主要作用是使同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体。 光复活作用 :经紫外线照射后的微生物暴露于可见光下时,可明显的降低其死亡率的现象。 切割修复作用:不需要可见光的作用,可以修复因形成嘧啶二聚体或因碱基错配等引起的多种DNA损伤。 对紫外线诱变的修复: 3.2.2碱基类似物诱变剂 诱变物质通过代谢渗入到DNA分子中去间接地引起碱基对的转换。诱发这类变异的化学物质主要是一些碱基的类似物,例如5-BU。 3.2.2碱基类似物诱变剂(5-BU) A:T A:BUk (酮式) G:BUe(烯醇式) A:T A:BUk G:C G: BUe G:C G:C A:BU G:C A:T A:BU A:T A:T G:C A:T G:C 3.2.3 引起DNA碱基发生化学变化的诱变剂 直接与DNA分子中碱基发生化学反应,改变这些碱基的性状,使DNA在下一轮的复制中出现错误配对现象。例如:亚硝酸。 G:C G:U A:U A:U A:T C:H T:H T:A C:H C:G G:C G:C T:A T:A A:T C:G 3.2自发突变与自然选育 在没有人为因素参与的自然条件下,微生物细胞群体能以一定的频率(通常在10-4-10-11之间)产生随机突变体。 微生物自身代谢产物的诱变效应 互变异构效应 4.诱变育种 诱变育种:利用物理和化学诱变剂对微生物细胞群体进行适当的处理,使之发生基因突变,并用有效的方法从诱变后的群体中选出优良正突变体,这就是诱变育种。 4.1选择出发菌株 出发菌株指的是用于进行诱变育种的原始菌株。 从自然界中直接分离出的野生型菌株 生产中筛选出来的自然突变菌株 诱变处理过的突变菌株 4.2选择诱变剂与诱变剂量 通常诱变剂的选择:根据经验以及使用的方便与否来选择所使用的诱变剂。在辐射类诱变剂中

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