實验四 细菌转导.pptVIP

实验四 细菌转导 厦门大学生命科学学院 实验目的 通过大肠杆菌噬菌体专一性转导半乳糖发酵基因学习掌握局限性转导的原理，掌握转导实验的基本方法 噬菌体介绍 噬菌体是指细菌病毒 生活周期：吸附、侵入、复制合成、装配、释放 烈性噬菌体 如T4 温和噬菌体 如?、Mu-1、P1和P2等 噬菌体结构 噬菌体组装 λ噬菌体载体 证明遗传物质是DNA而非蛋白质的Hershey-Chase实验 溶源菌的形成 ?噬菌体整合进大肠杆菌染色体中的固定位点上，这个位点在gal(半乳糖代谢基因)和bio(生物素合成基因)之间，这位点称为BOB’，它与?的附着位点POP’有相同的核心序列区，由15bp组成，它们通过同源单交换发生整合，形成溶源菌。 实验原理 转导定义： 以噬菌体作为媒介将一个细胞（供体）的遗传物质传递给另一个细胞（受体）的过程。 普遍性转导 P1和P2 局限性转导 λ λdg λdb 实验材料 菌株：E.coli k12(λ)gal+ k12Sgal- 用品：Eppondoff离心管(1.5ml/4.5ml) Tip枪头(1ml/200ul/20ul) 培养基(肉汤固体/半固体/加倍肉汤/EMB) 试剂：氯仿、磷酸buffer 实验步骤 噬菌体的诱导和裂解液的制备 取4ml