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- 2017-04-11 发布于河北
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临床医学检验毕业论文范文
临床医学检验毕业论文范文
能力与知识的关系,相信大家都很清楚。知识不是能力,但却是获得能力的前提与基础。而要将知识转化为能力,需要个体的社会实践。下面是编辑老师为大家准备的临床医学检验毕业论文。
大肠癌是发生于大肠部位的常见的消化道恶性肿瘤,居于消化道道肿瘤的第3位。
mTOR 信号通路是细胞内重要的生存信号转导通路,该通路的激活与肿瘤细胞的增殖、分化、逃避凋亡、耐药及血管生成密切相关[1]。 哺乳动物雷帕霉素靶(mammalian target of rapamycin , mTOR)和真核细胞翻译起始因子(eukaryotic initiation factor 4E)是mTOR 信号通路中的两个重要的分子。
1对象与方法
1.1 研究对象
收集2010年l0月至2012年6月来自乌海市第三人民医院的结肠癌根治术后癌及癌旁标本各60例.其中男28例、女32例,年龄22~80岁,按全国结直肠癌协作组1986年标准进行组织学分类,其中高分化l6例,中分化26例,低分化18例,TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分别为13、23和24例,其中淋巴结转移38例。
1.2 实验方法
按一步Trizol法 提取样本组织的RNA:按说明书配制20ul的RT反应液(反应液配制请在冰上进行)。 1 Total RNA用量为1ug。反转录反应条件如下: 37℃ 15 min , 85℃ 5 sec 按说明书配制50ul的PCR反应液,94 ℃ 30sec ,56 ℃* 15sec ,25Cycle72 ℃ 30sec 。设循环25个,实验采用GAPDH片段作为内参照。mTOR、eIF4E、GAPDH引物采用Oligo软件进行设计,由invitrogen公司合成(具体序列见表一)。取PCR产物5ul,加5xLoading Buffer 2ul,2%琼脂糖凝胶电泳 110V,100mA,25min,凝胶成像仪成像并保存结果。
表1 PCR引物详细序列:
1.3 按酶联免疫法(ELISA)试剂盒说明书检测mTOR,eIF4E基因蛋白表达 计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
1.4 统计学处理 实验数据采用表示,组间比较采用t 检验,两组以上比较采用方差分析,相关分析采用直线相关分析法分析。以SPSS13.0 统计软件进行统计学分析。P 0.05 为差异有统计学意义。
2 结 果
RT-PCR、Elisa法检测大肠癌及癌旁组织mTOR、eIF4E基因RNA水平的表达和蛋白表达结果一致。结果显示:大肠癌mTOR、eIF4E基因表达量结果一致,癌组织明显高于癌旁组织,差异显着有统计学意义(P0.05)(见图1,2,表2,4)。相对应内参基因GAPDH表达无差异(见图3)。大肠癌组织中mTOR、eIF4E基因表达与年龄、性别、TNM分期无关(P0.05),与组织分化程度、淋巴结转移有关(P0.05)(详见表3,5)。
mTOR基因和eIF4E基因相关性分析:60例大肠癌标本RT-PCR法检测mTOR基因和eIF4E基因灰度值相关性分析统计处理后结果为:r=0.892,Plt;0.05,二者呈明显正相关性。同样用Elisa法检测mTOR基因和eIF4E基因OD值相关性分析统计处理后结果为:r=0.563,Plt;0.05,二者呈明显正相关性图-1,2,3mTOR基因 、eIF4E基因 、GAPGH内参 RT-PCR电泳图
表格 2 RT-PCR法大肠癌及癌旁组织mTOR和eIF4E基因总RNA表达:(n=60,)
编辑老师在此也特别为朋友们编辑整理了临床医学检验毕业论文。更多详情请点击临床医学论文。
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