蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)分解.pptVIP

有机磷和氨基甲酸酯类 农药残留量快速检测 —酶抑制率法(分光光度法) ;分光光度法的原理简介 酶抑制率法(分光光度法);吸光光度法: 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法, 包括目测比色法和分光光度法。 不同物质由于结构不同,所吸收光的波长及吸收程度不同,这就是物质对光的选择性吸收 ;当一束强度为I0的平行单色光通过一均匀的吸收介质时，由于吸光物质分子与光子的作用，一部分光子被吸收，一部分光子透过介质。设透过的光强度为It，则透光率T定义为 T=It /I0，而－lgT称为吸光度A，即 Ａ＝－lgT=lgI0/It?;测量某物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长（?）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制吸光度随波长的变化可得一曲线，此曲线即为吸收光谱。 不同浓度的同一物质，它的最大吸收波长是不变的，但吸光度随浓度增大而增大。 在最大吸收波长处测量吸光度，其灵敏度最高。;有色溶液对某一波长光吸收的强度与有色物质的浓度c及吸光溶液的液层厚度b成正比，称为光吸收定律或朗伯－比尔定律，其数学表达式为 　　　　　　　　　　A=εbc;光电比色法; ; ;试剂 pH8.0缓冲溶液 分别取11.9g无水磷酸氢二钾与３.２g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。 显色剂 分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。 ;试剂 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。 乙酰胆碱酯酶 根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3min的吸光度变化ΔA0值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用。;分析步骤;结果计算 ;结果判定 ;酶抑制率法对部分农药的检出限;说明 ;THANK YOU