高考生物总复习 第十单元 专题4 生物技术在其他方面的应用配套课件.pptVIP

3．血红蛋白的提取与分离 (1)常用的蛋白质分离方法 ①凝胶色谱法 凝胶色谱法分离蛋白质的原理 分析比较列表如下： 　 　蛋白质 比较　　　 相对分子质量大 相对分子质量小 行进过程 排阻在凝胶颗粒 外面，迅速通过 进入凝胶颗粒 内部，被滞留 运动方式 垂直向下 垂直向下和无 规则扩散运动 运动路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出 ②电泳法原理：在一定pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 (2)实验流程 第一步　样品处理 ①红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，有利于后续步骤的分离纯化； ②血红蛋白的释放：使红细胞破裂，血红蛋白释放出来； ④图示： ⑤注意：透析时间为12 h。透析袋是用硝酸纤维素制成，小分子可自由进出，而大分子保留在袋内。 第三步　纯化 一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 ⑤注意：透析时间为12 h。透析袋是用硝酸纤维素制成，小分子可自由进出，而大分子保留在袋内。 第三步　纯化 一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 第四步　纯度鉴定 一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度